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  • 活細胞蛋白質標記與成像研究獲進展

    原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,華東理工大學光遺傳學與合成生物學交叉學科研究中心楊弋、朱麟勇、陳顯軍團隊在活細胞蛋白質標記與成像研究中取得重要進展,相關研究在《細胞發現》發表。 ?人造熒光蛋白及熒光探針。華東理工供圖生物過程可視化一直吸引著科學家的好奇心。不同類型的熒光成像工具可以幫助科學家觀察生命體中多種生物事件的發生過程,其中最著名的是熒光蛋白標記技術。熒光蛋白及其衍生技術經歷了近30年的飛速發展,為生物學各個領域的研究作出了極大貢獻,但伴隨著顯微鏡技術的飛速發展,現有熒光蛋白的性質已經難以適應新型儀器的成像要求。相比之下,基于蛋白質標簽和激活型熒光團的熒光標記工具憑借其理化性質成為新的研究熱點。該團隊針對自催化蛋白質標簽SNAP-tag,設計開發了高信噪比的青色人造熒光蛋白SmFP485。SmFP485......閱讀全文

    活細胞蛋白質標記與成像研究獲進展

    原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,華東理工大學光遺傳學與合成生物學交叉學科研究中心楊弋、朱麟勇、陳顯軍團隊在活細胞蛋白質標記與成像研究中取得重要進展,相關研究在《細胞發現》發表。 ???人造熒光蛋白及熒光

    蛋白質標記

    Biosynthetic labeling?(Sefton Lab)Biotinylation of Antibody?(Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl?(ScienceXchange)Protein (

    不同標記與非標記蛋白質組學定量準確性分析研究

      通過質譜法進行定量蛋白質組分析為生物醫學探索研究提供非常重要的途徑。 然而,了解生物樣品中的定量限制對于準確判斷結果非常重要。通過使用加入已知濃度的蛋白質標準品的復雜樣本,科學家們研究了無標記(label free)和基于標記(TMT和iTRAQ)的肽定量的定量限制,包括前體混合的評估及其對同重

    科學家首次實現活細胞RNA標記與無背景成像

    圖為《自然—生物技術》11月期封面圖片。它顯示了利用熒光RNA可對單細胞中mRNA的翻譯過程進行定量研究。癌細胞中mRNA水平與其編碼蛋白質水平之間存在較低相關性,提示癌細胞的翻譯調控顯著失調,這為癌癥的診療提供一種全新的思路。  華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年

    Nature子刊:首次實現活細胞RNA標記與無背景成像

       生物大分子標記技術是生物分子成像的關鍵。在科學歷史上,人們利用熒光蛋白“點亮”細胞內蛋白質, 實現了生命動態過程中蛋白質分子的可視化。熒光蛋白技術是當代生物科學研究中最重要的研究工具之一;在短短十余年內,其研究即被授予諾貝爾獎。RNA同樣具有獨特的結構、種類繁多的生物學功能以及復雜的時間空間分

    我所發展了相變蛋白質的共價鍵標記和成像方法

      近日,我所蛋白質折疊化學生物學創新特區研究組(02T5組)劉宇研究員團隊和生物分子高效分離與表征研究組(1810組)張麗華研究員團隊合作,通過發展新型仿生熒光共價鍵探針和質譜表征方法,發現了蛋白質聚集態界面具有化學反應活性,可用于相變蛋白質的標記與成像。  蛋白質在人體內的相變過程會誘發多種退行

    國際首次|我國學者實現活細胞RNA標記與無背景成像

      華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室的楊弋、朱麟勇等教授歷經7年合作研究,在熒光RNA及活細胞RNA成像領域獲突破性進展。他們原創的系列高性能熒光RNA,在國際上首次實現了不同種類RNA在動物細胞內的熒光標記與無背景成像。11月5日,該成果以封面論文形式發表于《自然—生物技術》。  熒光蛋白

    腫瘤細胞的標記及活體熒光成像

    摘要 以綠色熒光蛋白( GFP) 作為標記基因轉入人類肺癌細胞系(ASTC2a21) , 經800 mg/ L G418 篩選, 獲得5 株高表達細胞系. 利用流式細胞儀對GFP 表達的穩定性進行了初步研究, 結果表明本實驗中有些細胞株間GFP 表達穩定性有顯著差異( P < 0101) . 將穩定

    蛋白質的膠體金標記

    當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后,便可進行標記。具體步驟如下。(1)根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。(2)邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中,逐漸加入,lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中,大約需 5~10min。(3)繼

    蛋白質的膠體金標記

    當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后,便可進行標記。具體步驟如下。(1)根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。(2)邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中,逐漸加入,lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中,大約需5~10min。(3)繼續

    Nanolive實現無標記活細胞骨架與微絲3D成像分析

    間充質干細胞(MSC)是多能干細胞,可從臍帶組織,脂肪組織,牙髓或羊水中獲得,主要來源于人骨髓,能夠分化成各種間充組織如軟骨、脂肪、骨頭、肌肉、肌腱和基質組織。其特性使其成為非常有前途的醫學治療手段,是挑戰治療器官和組織修復的研究熱點,并且已經在一些如炎癥性腸病和其他免疫紊亂,或缺血性心臟病的應用中

    蛋白質的生物合成標記實驗

    甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞 甲硫氨酸短時間標記貼壁培養細胞 甲硫氨酸對細胞進行脈沖追蹤標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質

    蛋白質的生物合成標記實驗

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    蛋白質的生物合成標記實驗

    實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 甲硫氨酸PBS儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?培養懸浮細胞至對數增長期,室溫300 g 離心5 min。回收107~108細胞。?2. ?每2×107細胞用約10 ml 37℃的短時間標記培養基在圓錐型試管中洗滌,于室溫300 g 離心5 min 回收細胞,小

    膠體金標記蛋白質的純化

    標記好的免疫金探針必須經過純化處理才能用于IHC染色,尤其是免疫電鏡的染色。純化的目的就是除去其中未標記的蛋白質,未充分標記的膠體金及在標記過程可能形成的各種聚合物。其純化方法有超速離心法、色譜柱法以及以上二者相結合應用。(一)超迷離心法根據膠體金顆粒大小不同及蛋白質種類不同,離心的轉速和時間也不同

    熒光成像與高光成像區別

    熒光成像與高光成像區別如下:1、原理:熒光成像是利用熒光標記的分子在激發后發出特定波長的光來成像,而高光成像是基于樣本的反射或透射光強度的差異來成像。2、樣本處理:熒光成像需要在樣本中引入熒光標記物,通常是通過染色或基因工程技術來實現,而高光成像則不需要對樣本進行特殊處理,直接觀察樣本的自然反射或透

    靶蛋白的放射標記實驗—酵母和細菌蛋白質代謝放射標記

    實驗材料細胞儀器、耗材基本培養基實驗步驟1. 接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基,于合適溫度中度振蕩培養過夜。2. 用新鮮的基本培養基稀釋培養物,繼續溫育至 107?細胞/ml (酵母)或對數期中期(細菌)。3. 5000 g 室溫離心 10 分鐘收集細胞,用無硫酸鹽基本培養基

    活體成像中熒光色素標記細胞的方法

    實驗概要本實驗以研究干細胞活體移植后的存活率為例,簡介了一兩種內源性熒光色素標記的實驗方法。實驗原理活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Lucifer

    光學成像與光聲成像對比

    小動光學活體成像主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標記。利用一套非常靈敏的光學檢測儀器,讓研究

    重組蛋白質的代謝標記實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒

    頭發中獨特蛋白質標記可識別身份

      DNA檢測技術已在尋找罪犯方面發揮很大威力。但DNA檢測是找到犯罪分子的唯一手段嗎?美國一項最新研究稱,頭發中的獨特蛋白質標記同樣可以用于身份識別,讓那些犯罪分子無所遁形。   每個人的DNA都是獨一無二的,這是DNA檢測常用于犯罪調查或考古研究的原因所在。但這一手段也存在不足,因為隨著時

    蛋白質的生物合成標記實驗(一)

    甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞生物按照從脫氧核糖核酸 (DNA)轉錄得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遺傳信息合成蛋白質的過程。由于mRNA上的遺傳信息是以密碼(見遺傳密碼)形式存在的,只有合成為蛋白質才能表達出生物性狀,因此將蛋白質生物合成比擬為轉譯或翻譯。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS

    重組蛋白質的代謝標記實驗

    實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材 培養瓶離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病毒分別準備一個平皿供感染用,并準備一個對照平皿供野生型桿狀病毒感染。于27℃溫育

    頭發中獨特蛋白質標記可識別身份

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    重組蛋白質的代謝標記實驗

    由于重組蛋白質表達的時候,宿主蛋白質的合成基本終止,因此體內代謝標記是檢測重組蛋白質的敏感方法。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材培養瓶離心機轉子實驗步驟1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病

    蛋白質的生物合成標記實驗(三)

    實驗材料細胞試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?準備和用[35S]甲硫氨酸標記細胞,用0.2~1 mCi/ml 的[35S]甲疏氨酸脈沖標記細胞5~30 min。?2. ?脈沖標記后,除去[35S]甲硫氨酸培養基,用10 ml 于37℃追加培養基冼細胞1次,加入10 ml

    蛋白質的生物合成標記實驗(二)

    實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS甲硫氨酸儀器、耗材培養箱離心機實驗步驟1. ?在100 mm 直徑的培養皿上培養貼壁細胞(0.5~2×107)至70%~90%匯片,吸去培養液,用10 ml 于37℃短時間標記培養基輕輕搖晃冼兩次細胞。2. ?加入5 ml 于37℃短時間標記培養基,在5%CO2的加濕培

    多光子顯微鏡成像:無標記成像在發育生物學中的應用

    光學成像可用于發育生物學,從而了解生物體的形成、揭示組織再生機制、認識并管理先天性缺陷和胚胎衰竭等。其中最受關注的兩個問題:一是心臟在早期發育中會發生劇烈的形態變化,其潛在功能和生物力學方面仍有待研究;二是中樞神經系統發育異常會導致先天性的疾病,所以需要從動力學、功能和生物力學等方面對大腦發

    研究實現單個納米尺度物體無標記光學顯微成像

    原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519411.shtm

    新技術:無標記激光解吸電離質譜成像技術

      近日,中科院化學研究所活體分析化學重點實驗室研究人員聯合美國約翰惠普金斯醫學院的學者,發展了一種新型無標記激光解吸電離質譜成像技術(LDI MSI)。  研究人員選擇新型過渡金屬二硫化物-MoS2納米載藥系統,使用LDI MSI技術,可以根據MoS2納米片和其負載的抗癌藥物阿霉素(DOX)在激光

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