關于高效液相色譜的過濾器的相關介紹
?檢查溶劑過濾器 查看過濾器是否變色(尤其是盛放水相的溶劑瓶)–擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，此時溶劑會因為重力流出。當脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出–臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常。 ?清潔溶劑過濾器 將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下，用水沖洗殘留之溶劑，然后將過濾器放在裝有濃硝酸(35%左右)的燒杯里浸一小時。用二次蒸餾水徹底沖洗過濾器至水為中性可以把過濾器放在塑料燒杯內超聲清洗。但是不可使用玻璃器皿將過濾器重新裝好。 ?建議：定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶(可以高溫滅菌)，每三個月至少清洗一次。......閱讀全文
關于高效液相色譜的過濾器的相關介紹
?檢查溶劑過濾器 查看過濾器是否變色(尤其是盛放水相的溶劑瓶)–擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，此時溶劑會因為重力流出。當脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出–臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常。 ?清潔溶劑過濾器 將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下，用水沖洗殘留之溶劑，然后
高效液相色譜的液液分配的相關介紹
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于高效液相色譜計算公式： 式中，cs—溶質在固定相中濃度；cm—溶質在流動相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC
關于高效液相色譜的歷史介紹
1903年俄國植物化學家茨維特（Tswett）首次提出“色譜法”（Chromatography）和“色譜圖”（Chromatogram）的概念。茨維特使用色譜法 chromatography （來自希臘字， chroma 意思是顏色， graphy 意思是記錄 ?-直譯為顏色記錄）來描述他的彩色
關于高效液相色譜的特點介紹
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點： ①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。 ②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。 ③高效：分離效
高效液相色譜的內標法的相關介紹
采用不加校正因子的峰面積法。取供試品，按各品種項下規定的方法配制不含內標物質的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖Ⅰ；再配制含有內標物質的供試品溶液，在同樣的條件下注樣，記錄色譜圖Ⅱ。記錄的時間除另有規定外，應為該品種項下規定的內標峰保留時間的倍數，色譜圖上內標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上，否則
關于高效液相色譜的液液分配原理介紹
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜
關于高效液相色譜的應用實例介紹
高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大（大于400以上）的有機物（這些物質幾乎占有機物總數的75%～80%）原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據統計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色
關于高效液相色譜的內標法介紹
采用不加校正因子的峰面積法。取供試品，按各品種項下規定的方法配制不含內標物質的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖Ⅰ；再配制含有內標物質的供試品溶液，在同樣的條件下注樣，記錄色譜圖Ⅱ。記錄的時間除另有規定外，應為該品種項下規定的內標峰保留時間的倍數，色譜圖上內標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上，否則
關于高效液相色譜的化學結構介紹
若樣品中包含離子型或可離子化的化合物，或者能與離子型化合物相互作用的化合物（例如配位體及有機螯合劑），可首先考慮用離子交換色譜，但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地應用于離子化合物；異構體的分離可用液固色譜法；具有不同官能團的化合物、同系物可用液液分配色譜法；對于高分子聚合物，可用空間排阻色譜法
關于超高效液相色譜的應用介紹
如今，超高效液相色譜儀主要應用于 （1）藥物分析 如天然產物中復雜組分的分析 （2）生化分析 如蛋白質、多肽、代謝組學等生化樣品 （3）食品分析 如食品中農藥殘留的檢測 （4）環境分析 如水中微囊藻毒素的檢測 （5）其他 如化妝品中違禁品的檢測 超高效液相色譜儀尤其對中藥研究領域的發
高效液相色譜的外標法的相關介紹
按各品種項下的規定，精密稱（量）取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品和供試品待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量： A 含量(mx)=mr×-Ar式中各符號意義同上 由于微量注射器不易精確控制進樣量，當采用外標法測定供試品中某雜質或主成分含量
關于高效液相色譜的液—固分配原理介紹
流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據物質吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是：當試樣進入色譜柱時，溶質分子 (X) 和溶劑分子(S)對吸附劑表面活性中心發生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是S)，可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm式中：X
有關高效液相色譜分析的相關介紹
系統適用性 按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整，應達到規定的要求；或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子. 色譜柱 在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規定的內標物質溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分或內標物質峰的保留時間t(R
高效液相層析的相關介紹
高效液相層析（又名高壓液相色譜），70年代新發展的層析法。其特點是：用高壓輸液泵，壓強最高可達5000psi（相當于34個標準大氣壓）。高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送（最高輸送壓力可達3.5萬KPa）；色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填
關于高效液相色譜分析的高壓泵的相關介紹
HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6 mm)，所用固定相的粒度也非常小（幾μm到幾十μm)，所以流動相在柱中流動受到的阻力很大，在常壓下，流動相流速十分緩慢，柱效低且費時。為了達到快速、高效分離，必須給流動相施加很大的壓力，以加快其在柱中的流動速度。為此，須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效
高效液相色譜的應用介紹
高效液相色譜應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域。 (1)分離混合物 高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。 通過與試樣預處理技術相配合，高效液相
高效液相色譜的性質介紹
高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography簡稱HPLC）又稱高速或高壓液相色譜。該方法是吸收了普通液相層析和氣相色譜的優點，經過適當改進發展起來的。它既有普通液相層析的功能（可在常溫下分離制備水溶性的物質），又有氣相色譜的特點（即高壓，高速，高分辨
關于高效液相色譜的基本信息介紹
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混
關于超高效液相色譜的優缺點介紹
超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本相同，所改變的地方有以下幾點： （1）小顆粒、高性能微粒固定相的出現。 高效液相色譜的色譜柱，例如常見的十八烷基硅膠鍵合柱，它的粒徑是5um，而超高效液相色譜的色譜柱，會達到3.5um，甚至1.7um。這樣的孔徑更加利于物質分離。 （2）超高壓輸液泵
關于高效液相色譜設備的梯度洗脫的介紹
類似于GC中的程序升溫。已成為現代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提，就是載液中含有兩種（或更多）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性，通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素，以提高分離效果。梯度洗提可以分為兩種： a.低壓梯度（也叫外梯度）：在常
關于高效液相色譜的檢測器的介紹
⑴紫外光度檢測器 它的作用原理是基于被分析試樣組分對特定波長紫外光的選擇性吸收，組分濃度與吸光度的關系遵守比爾定律。最常用的檢測器，應用最廣，對大部分有機化合物有響應。 特點： a.靈敏度高：其最小檢測量10-9g·mL-1,故即使對紫外光吸收很弱的物質，也可以檢測； b. 線性范圍寬；
關于高效液相色譜的空間排阻的介紹
空間排阻色譜法以凝膠(gel) 為固定相。它類似于分子篩的作用，但凝膠的孔徑比分子篩要大得多，一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離，而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱后，隨流動相在凝膠外部間隙以及孔
關于超高效液相色譜的簡介
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。超高效液相色譜是一個新興的領域，作為世界第一個商品
關于液相色譜柱的再生的相關介紹
因為，色譜柱是消耗品，隨著使用時間或進樣次數的增加，會出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰的現象，一般來說是柱效的下降。 1.反向柱的再生： 依次采用20～30倍的色譜柱體積的甲醇：水=10：90(V/V)，乙腈，異丙醇作為流動相沖洗色譜柱，完成后再以相反順序沖洗色譜柱。 2.正相柱的再生
關于高效液相色譜分析的流程介紹
高效液相色譜分析，由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統，然后輸出，經流量與壓力測量之后，導入進樣器。被測物由進樣器注入，并隨流動相通過色譜柱，在柱上進行分離后進入檢測器，檢測信號由數據處理設備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。
高效液相色譜之高效排阻液相色譜
高效液相色譜（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高壓、高速、近代液相色譜，通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法，到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面，現已成為分離純化蛋白質非常有效的方
高效液相色譜之高效反相液相色譜（二）
附：色譜柱操作說明，（以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例）1. 色譜柱常規參數訂貨號：Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如，Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
高效液相色譜之高效反相液相色譜（一）
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色
高效液相色譜的歷史起源介紹
1960年代，為了分離蛋白質、核酸等不易汽化的大分子物質，氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數，以高壓驅動流動
關于高效液相色譜的離子交換的原理介紹
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流 動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換，依據這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：X-（溶劑中） (樹脂