蛋白質的定量測定——微量凱氏定氮法(microKjeldahlmethod)
實驗原理生物材料的含氮量測定在生物化學研究中具有一定的意義，如蛋白質的含氮量約為16％，測出含氮量則可推知蛋白含量。生物材料總氮量的測定，通常采用微量凱氏定氮法。凱氏定氮法由于具有測定準確度高，可測定各種不同形態樣品等兩大優點，因而被公認為是測定食品、飼料、種子、生物制品、藥品中蛋白質含量的標準分析方法。其原理如下：1. 消化：有機物與濃硫酸供熱，使有機氮全部轉化為無機氮——硫酸銨。為加快反應，添加硫酸銅和硫酸鉀的混合物；前者為催化劑，后者可提高硫酸沸點。這一步約需30min至1h，視樣品的性質而定。2. 加堿蒸餾：硫酸銨與NaOH(濃)作用生成(NH4)OH, 加熱后生成NH3, 通過蒸餾導入過量酸中和生成NH4Cl而被吸收。3. 滴定：用過量標準HCl吸收NH3，剩余的酸可用標準NaOH滴定，由所用HCl摩爾數減去滴定耗去的NaOH摩爾數，即為被吸收的NH3摩爾數。此法為回滴法，采用甲基紅衛指示劑。HCl＋NaOHNaCl ......閱讀全文
蛋白質的定量測定——微量凱氏定氮法(micro－Kjeldahl－method)
實驗原理生物材料的含氮量測定在生物化學研究中具有一定的意義，如蛋白質的含氮量約為16％，測出含氮量則可推知蛋白含量。生物材料總氮量的測定，通常采用微量凱氏定氮法。凱氏定氮法由于具有測定準確度高，可測定各種不同形態樣品等兩大優點，因而被公認為是測定食品、飼料、種子、生物制品、藥品中蛋白質含量的標準分析
食品中蛋白質含量測定（凱氏定氮法，Kjeldahl－Method）
一、目的與要求1、學習凱氏定氮法測定蛋白質的原理。2、掌握凱氏定氮法的操作技術，包括樣品的消化處理、蒸餾、滴定及蛋白質含量計算等。二、實驗原理蛋白質是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化，使蛋白質分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨，留在消化液中，然后加堿蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后，再用鹽酸
粗蛋白的定量測定—微量凱氏定氮法
一、實驗目的1.掌握凱氏定氮法測定蛋白質含量的原理和方法。2.學會使用凱氏定氮儀。二、實驗原理蛋白質是由碳、氫、氧、氮及少量硫元素組成。這些元素在蛋白質中含量都有一定比例關系，其中含碳50～55%、氫6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。此外在某些蛋白質中還含有微量的磷、鐵、
蛋白質定量檢測方法——凱氏定氮法
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收，再以標準鹽酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定
A－Method－for－MicroScale－Isolation－and－Purification－of－Gangliosides
A Method for Micro-Scale Isolation and Purification of GangliosidesStephan Ladisch~Director, Center for Cancer and Transplant Biology, Children's
蛋白質測定儀在牛奶蛋白質測定中的應用
蛋白質測定儀可以對牛奶（包括純奶、核桃、燕麥、紅棗牛奶、牛初乳）、奶粉（包括牛初乳粉）、豆粉、豆奶粉和雞蛋等樣品中蛋白質含量的測定。適用于乳制品質監站、產品質 量監督檢驗所、農產品檢測中心、畜牧水產品檢測站、出入境檢驗檢疫局、工商、衛生等部門對牛奶、奶粉、豆粉、豆奶粉及雞蛋等樣品中蛋白質的快速定量檢
蛋白質的測定凱氏定氮法
1)原理樣品與硫酸和催化劑一同加熱后消化,使蛋白質分解,其中的碳和氫分別被氧化成二氧化碳和水蒸氣逸出,而有機氮轉化成氨后與硫酸結合生成硫酸銨,然后在堿性條件下蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再用硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即得蛋白質含量。以甘氨酸為例,該過程的反應方程式如下:消化?
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質
1)原理同常量凱氏定氮法。2)主要儀器①凱氏燒瓶(100mL)。②微量凱氏定氮蒸餾裝置3)試劑①0.0100mol/L鹽酸標準溶液。②20g/L硼酸吸收液:稱取20g硼酸溶解于1000mL熱水中,搖勻備用。③其他試劑同常量凱氏定氮法。4)操作方法(1)樣品消化? ? 精密稱取均勻固體樣品0.2～2.
用微量凱氏定氮法對粗蛋白的測定
一、實驗目的 1.掌握凱氏定氮法測定蛋白質含量的原理和方法。 2.學會使用凱氏定氮儀。 二、實驗原理 蛋白質是由碳、氫、氧、氮及少量硫元素組成。這些元素在蛋白質中含量都有一定比例關系，其中含碳50～55%、氫6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。此外在某些蛋白質中
蛋白質定量/蛋白質含量的測定(LOWRY法)
實驗概要運用LOWRY法測定蛋白質的含量。實驗原理Lowry法是雙縮脲法和福林酚法的結合與發展，其原理是：蛋白質溶液用堿性銅溶液處理，形成銅-蛋白質的絡合鹽，再加入酚試劑后，除使肽鏈中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等顯色外，還使雙縮脲法中肽鍵、堿性銅的顯色效果更強烈。因此，Lowry法的顯色效果比單獨使用
凱氏定氮法如何測定蛋白質的含量
（一）消化 1、準備6個凱氏燒瓶，標號。1、2、3號燒瓶中分別加入適當濃度的蛋白溶液1.0mL，樣品要加到燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g，濃硫酸2.0mL，30%過氧化氫1.0mL。4、5、6號燒瓶作為空白對照，用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質，對樣品測
蛋白質的測定方法之凱氏定氮法
一? 凱氏定氮法這種方法是1883年Kjeldahl發明，當時凱氏只使用H2SO4來分解試樣，來定量谷物中的pro，他只知用H2SO4分解試樣，而不能闡明H2SO4分解有機氮化合物生成氨的反應歷程，所以只使用H2SO4分解試樣，需要較長時間，后來由Gunning加入改進，他改進的辦法是在消化時加入K
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質方法原理
樣品與硫酸和催化劑一同加熱后消化,使蛋白質分解,其中的碳和氫分別被氧化成二氧化碳和水蒸氣逸出,而有機氮轉化成氨后與硫酸結合生成硫酸銨,然后在堿性條件下蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再用硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即得蛋白質含量。以甘氨酸為例,該過程的反應方程式如下:消化? ? 2
改良微量凱氏定氮法測定血清蛋白質總量
實驗概要改良微量凱氏定氮法測定血清蛋白質總量實驗原理? ? ? ? 蛋白質是機體內主要的含氮物質，而且氮元素的含量相當恒定，一般為16％，其它非蛋白質的含氮化合物所占的氮量甚微。因此，測定生物樣品的含氮量，即可推算蛋白質含量。? ? ? ? 測定生物樣品中的含氮量，最常用的方法是凱氏定氮法，本實驗采
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質的方法介紹
微量凱氏定氮法1)原理同常量凱氏定氮法。2)主要儀器①凱氏燒瓶(100mL)。②微量凱氏定氮蒸餾裝置3)試劑①0.0100mol/L鹽酸標準溶液。②20g/L硼酸吸收液:稱取20g硼酸溶解于1000mL熱水中,搖勻備用。③其他試劑同常量凱氏定氮法。4)操作方法(1)樣品消化? ? 精密稱取均勻固體樣
蛋白質測定儀法與凱氏定氮法的對比
采用凱氏定氮法檢測蛋白質，此法由人工操作，比較費時，檢測結果的準確性容易受人為因素影響，現國際上普遍采用蛋白質測定儀檢測蛋白質。同凱氏法相比蛋白質測定儀具有自動、省時、準確的優點。凱氏定氮法與蛋白質測定儀法的原理一樣，不同在處在于前者使用經典凱氏定氮燒瓶及定氮蒸餾裝置進行樣品消化和蒸餾，手工滴定計算
原位微量BCA蛋白定量法
簡述：傳統標準的BCA蛋白定量分析方法常規均使用試管或者微孔板進行檢測，通過對傳統方法進行改進，可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多體積檢測板進行原位微量BCA法蛋白定量分析。待測蛋白樣品和BCA工作緩沖液按照順序直接加在Take3TM板的微量定量孔處、溫浴，使用EpochTM
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質注意事項
①蒸餾前給水蒸氣發生器內裝水至2/3體積處,加甲基橙指示劑數滴及硫酸數毫升,以使其始終保持酸性,這樣可以避免水中的氨被蒸出而影響測定結果,同時可以指示因水蒸氣氣壓不足而使氨氣發生倒吸溶于水中,使得測定結果偏低。②在蒸餾時,蒸汽發生要均勻充足,蒸餾過程中不得停火斷汽,否則將發生倒吸。③加堿要足量,操作
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質儀器和試劑
主要儀器①凱氏燒瓶(100mL)。②微量凱氏定氮蒸餾裝置試劑①0.0100mol/L鹽酸標準溶液。②20g/L硼酸吸收液:稱取20g硼酸溶解于1000mL熱水中,搖勻備用。③其他試劑同常量凱氏定氮法。
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質操作方法
(1)樣品消化? ? 精密稱取均勻固體樣品0.2～2.0g,或半固體樣品2～5g或吸取液體樣品10～20mL,小心移入100mL干燥的凱氏燒瓶中。向瓶內加入0.2g硫酸銅、3g硫酸鉀及一定量的濃硫酸(每克樣品加硫酸15mL)將凱氏燒瓶45°傾斜置于電爐上。同常量法消化至消化液呈透明藍綠色溶液時,再繼
微量凱氏定氮法測定食品中蛋白質計算公式
計算式中? ? w——蛋白質的質量分數,%;? ? ? ? ? ?V0——滴定空白蒸餾液消耗鹽酸標準液體積,mL;? ? ? ? ? ?V1——滴定樣品蒸餾液消耗鹽酸標準液體積,mL;? ? ? ? ? ?c——鹽酸標準液的濃度,mol/L;? ? ? ? ? ?0.014——氮的摩爾質量,g/mo
測定蛋白質含量只有凱氏定氮法嗎
當然不是一、微量凱氏（kjeldahl）定氮法樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨（消化），氨又與硫酸作用，變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例，其反應式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so
蛋白質含量測定法凱氏定氮法
本法系依據蛋白質為含氮的有機化合物，當與硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化時使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定，根據酸的消耗量算出含氮量，再將含氮量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。 本法靈敏度較低，適用于0.2～2.0mg氮的測定。氮
蛋白質含量的定量測定——雙縮脲法（Biuret法）
實驗原理具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆有雙縮脲反應。在堿性溶液中雙縮脲與銅離子結合形成復雜的紫好色復合物。而蛋白質及多肽的肽鍵與雙縮脲的結構類似，也能與Cu2+形成紫紅色絡合物，其最大光吸收在540nm處。其顏色深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質的分子量及氨基酸的組成無關，該法測定蛋白質的濃度范圍
蛋白質的定量測定——福林酚法(Folin—酚試劑法)
實驗原理 Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Folin—酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這個方法的優點是靈敏度高，比雙縮脲法靈敏得多，缺點是費時較
高效液相色譜法快速檢測酸奶蛋白飲料中三聚氰胺
三聚氰胺是一種親水性很強的小分子，在傳統的反相色譜中不被保留，無法與其他物質分離。? 該方法的原理是用水和乙腈提取樣品中的三聚氰胺，然后用高效液相色譜法測定，用外標法定量。標準工作曲線的相關系數為r: 0.99998? 精密度試驗的相對標準偏差為0.3％，標準加入回收率為98.37±9975
凱氏定氮法對食品中蛋白質含量的測定
實驗概要本實驗用凱氏定氮法（Kjeldahl Method）測定了食品中蛋白質含量，目的學習凱氏定氮法測定蛋白質的原理，掌握凱氏定氮法的操作技術，包括樣品的消化處理、蒸餾、滴定及蛋白質含量計算等。實驗原理蛋白質是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化，使蛋白質分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸
蛋白質定量/蛋白質含量的測定(考馬斯亮藍法)
實驗概要運用考馬斯亮藍法測定蛋白質的含量。實驗原理考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白質濃度范圍內（0～100μg/ml），蛋白質－色素結合物在595
選用凱氏定氮儀需要考慮哪些問題選擇
蛋白質定量法雖然很多，但至今仍將19世紀末丹麥化學家凱道爾發現的凱氏定氮法作為法定的標準方法。 在眾多測定方法中，因為凱氏定氮法校準方法方便、快捷、準確。在各種定量法中仍占重要地位，當報道一種新方法時，通常是將新法測定的結果同凱氏法相比較，并探討其相關性。凱氏定氮法又根據儀器裝置、樣品與試
藥物疫苗中蛋白檢測的TN分析法
背景介紹在藥物疫苗生產中，需要對起始、中間和最終產品的抗原水平進行控制。用以檢測衰減或失活的病毒或細菌數量。由于這些抗原通常由蛋白質組成，總蛋白的分析定量是一種可選方法。《藥典》規定了許多相關方法，其中包括幾種紫外/可見分光光度法（如Lowry法、Bradford法、BCA法）以及兩種總氮法，即凱氏