細胞培養相關問題及解答(一)
小牛血清和胎牛血清有何區別？應用注意事項？ 來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。 血清保存和使用須注意：血清應保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。 胰酶消......閱讀全文
細胞培養相關問題及解答(一)
小牛血清和胎牛血清有何區別？應用注意事項？ 來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 組份與比例不同：兩者所含的促細
細胞培養常見問題解答（一）
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
細胞培養常見問題解答（一）
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
細胞培養常見問題與解答1
1.為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在進行免疫學研究、培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。2.如何用臺盼蘭計數活細胞？用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200－2000個/毫升，在0
細胞培養常見問題與解答3
15.如何檢測內毒素(熱源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）試驗是可用的最敏感和特異的檢測細菌內毒素的方法。Levin和Bang 發現細菌可引起鱟（Limulus polyphemus）血管內的凝集作用。內毒素啟動一個細胞內酶原系統（絲氨酸蛋白酶級
細胞培養常見問題與解答4
22.在High Five無血清培養基中去污劑的濃度是多少？ High Five無血清培養基中去污劑的濃度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five細胞用多大的密度凍存？ 3.0x10E6 ce
細胞培養常見問題與解答2
8.培養基中丙酮酸鈉的作用是什么？丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。9.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀？GIBICO的胎牛血清 沒有預老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白
細胞培養常見問題解答
1.如何選用特殊細胞系培養基？?培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始。??2.何時須更換培養基？?視細胞生長密度而定， 或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更
電極相關問題解答
電極是雷磁電化學分析儀器的重要配件，用戶在購買電極后可能會出現一些不懂的問題。本站技術文員總結了幾個常見問題的相關回答，以供參考！ 1、232參比電極用什么液體保存？ 答：3.3-3.8mol/L飽和氯化鉀溶液 2、電導率電極絕緣差？ 答：電導電極的兩個極片是隔離開的 3、0.0
ELISA相關問題在線解答
日前，有客戶在網上留言咨詢一些問題，我司何經理都一一解答，現在小編就帶大家來看看何經理與客戶的在線是問答吧。 ?客戶：在稀釋抗體中加入的蛋白穩定劑是什么？ 何經理：一般就先用一些無關蛋白，如果不行可以添加少量甘油，再不行的話則需購買專門的穩定劑了。客戶：在試劑盒的研發中抗體是*重要的嗎？何經理：原料
細胞培養板的選擇與常見問題解答（一）
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。（1）平底和圓底（U型和V型）培養板的區別和選擇：貼壁細胞一
細胞培養常見問題解答（三）
21 偵測出細胞株有支原體污染時， 該如何處理?直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株。22 CO2 培養箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。23 為何培養基保存于4 °C 冰箱中，顏色會偏暗紅色， 且pH值會越來越偏堿性?培養基保存于4 °C 冰箱中，
細胞培養中的各種問題解答
在培養細胞的過程中，或許你會有一系列的問題想要問。今天為大家整理了一些關于細胞的常見問題解答。一、細胞成長曲線測守時為什么要做重復孔？答：測定細胞成長曲線細胞計數時挑選 3 個復孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作差錯。二、為什么制作的細胞成長曲線沒有到達平臺期？答：可能有以下原因：一是細
細胞培養常見問題解答（四）
另：這里補充一下培養用品的消毒，供參考：細胞培養的最大危險是發生培養物的細菌，真菌和病毒等微生物的污染，污染主要是由于操作者的疏忽而引起，常見的原因有操作間或周圍空間的不潔，培養器皿和培養液消毒不合格或不徹底，由于有關培養的每個環節的失誤均能導致培養失敗，故細胞培養的每個環節都應嚴格遵守操作常規，防
細胞培養常見問題解答（二）
11 欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞， 其離心速率一般為300xg (約1,000rpm)，5 - 10 分鐘， 過高之轉速， 將造成細胞死亡。12 細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生
細胞培養常見問題解答（二）
16 細胞欲冷凍保存時， 細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數目一般為1x106 cells/ml vial， 融合瘤細胞則以5x106 cells/ml vial 為宜。17 應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室
細胞培養（cell－culture）的一些常見問題與解答1
1、細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++， Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH 8.0， 溫度37 ℃其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一
細胞培養（cell－culture）的一些常見問題與解答2
6、血清的有關問題：新生牛血清：新出生牛5天內取血制成小牛血清：小牛出生16周以內采血制成。胎牛血清：（進口血清）要求剖腹取胎制成。國內廠家往往不能做到，經常把出生2天以內采血稱為胎牛血清。根據血清的生產工藝及血紅蛋白、內毒素含量又分為：（1）特級胎牛血清：40納米過濾，內毒素含量≤10EU，血紅蛋
細胞培養（cell－culture）的一些常見問題與解答2
6、血清的有關問題：新生牛血清：新出生牛5天內取血制成小牛血清：小牛出生16周以內采血制成。胎牛血清：（進口血清）要求剖腹取胎制成。國內廠家往往不能做到，經常把出生2天以內采血稱為胎牛血清。根據血清的生產工藝及血紅蛋白、內毒素含量又分為：（1）特級胎牛血清：40納米過濾，內毒素含量≤10EU，血紅蛋
細胞培養（cell－culture）的一些常見問題與解答1
1、細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++， Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH 8.0， 溫度37 ℃其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一
旋轉蒸發儀相關問題解答
Q1：IKA旋轉蒸發儀?(配置鍍防爆膜玻璃組件)?可以達到的最低真空度是多少?A1：最低可達?1 mBar，在真空系統足夠強勁且所有的真空連接都非常密實的情況下。?Q2：豎直型冷凝器和傾斜型冷凝器，哪種比較好?A2：對于應用要求來說兩者的冷凝效果相當。這兩種冷凝器的冷凝面積和冷卻效率是一樣的。?Q3
多肽合成的基本原理及相關問題解答
1.多肽合成的基本原理?多肽固相合成法是多肽合成化學的一個重大的突破。它的最大特點是不必純化中間產物，合成過程可以連續進行，進而為多肽合成的自動化奠定了基礎。目前全自動多肽的合成，基本都是固相合成。其基本過程如下：基于Fmoc化學合成，先將所要合成的目標多肽的C-端氨基酸的羧基以共價鍵形式與一個不溶
蛋白質組學相關問題與解答
1．為什么通過elisa、WB能檢測到的蛋白在itraq實驗中沒有檢測到？ 人血漿中的蛋白是有上萬種的，而一般質譜只能檢測到五六百種，也就是說只占了其中的百分之幾，這是普遍現象，說明咱們的方法是不存在問題的；其次，ELISA/WB與質譜相對來說靈敏度不一樣，前者具有放大效應，因為其間會用
western－blot常見問題及解答
常見問題及解答： 1 、兩快玻璃板之間灌膠 , 膠為什么總是不平 ? 1)你的玻璃洗干凈沒有？應該要洗得非常干凈！ 2)過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對較多，凝膠凝固過快也會膠不平，最多按照分子克隆加倍 3)加完試劑以后沒有很好的搖勻，導致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快
能力驗證常見問題及解答
一、 CNAS-RL02《能力驗證規則》中基本要求的相關問題 ： 申請認可時，是否必須參加能力驗證？參加能力驗證的最低要求是什么？ CNAS-RL02《能力驗證規則》4.2.3款規定“只要存在可獲得的能力驗證，合格評定機構初次申請認可的每個子領域應至少參加過1次能力驗證且獲得滿意結果（申請認
PCR儀常見問題及解答
? 聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行
細胞培養的八個常見問題與解答(FAQ)
1 冷凍管應如何解凍？ 取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。 2 細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DM
微生物檢測過程中的問題及解答集錦（一）
1.微生物實驗過程中使用的移液槍怎么滅菌？答：移液槍用紗布包好，外面報紙包好滅菌。不能濕熱滅菌的槍，在槍口處塞入少許棉花，外面采用表面滅菌的方法擦拭滅菌，里面采用熱空氣交換法或者潔凈空氣交換法處理。 2.微生物實驗過程中如果移液槍槍頭想要重復使用怎么辦？答：槍頭盒裝好，報紙包好滅菌。槍頭少的話放入平
關于HPLC的常見問題及解答
一、問：用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？答：關于漂移問題： 1． 溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定。 2． 流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。 3． 柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡。關于快速變化問題
關于HPLC的常見問題及解答
一、問：用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？答：關于漂移問題： 1． 溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定。 2． 流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。 3． 柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡。關于快速變化問題