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  • 細胞總乙酰化水平的快速測定方法

    細胞總乙酰化水平的快速測定方法 -------免疫親和色譜-ELISA 方法 步驟一:親和色譜分離提純乙酰化蛋白 1. 用細胞裂解液裂解細胞,10000rpm 離心2 分鐘,取上清備用。 2. 取20-40ul 抗乙酰化賴氨酸抗體填料(Anti-acetylated lysine Agarose,ICP0388,如右圖所示), 用PBS 洗2 次,每次1ml。 3. 將細胞裂解上清液與洗好的填料(ICP0388)混勻,39oC 旋轉搖床低速孵育60 分鐘。 4. 1000rpm 離心1 分鐘,去上清,用PBSt 重懸沉淀,1000rpm 離心1 分鐘,去上清,重復3 次, 最后一次用PBS 洗,吸棄上清。 注:細胞裂解液里應該含有蛋白酶抑制劑,組蛋白乙酰化酶抑制劑等。 步驟二:釋放及包被固定分離提純的乙酰化蛋白 5. 用20ul 0.1M HCL 將步驟2......閱讀全文

    細胞總乙酰化水平的快速測定方法

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    快速測定水中總磷的綠色實驗方法

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