植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗（二）
3.5 純度鑒定可以通過各種細胞器標志性酶的活性來確定線粒體的污染程度。過氧化物酶體可以鑒定過氧化氫酶、羥基丙酮酸還原酶或者乙二醇氧化酶的活性；葉綠體可以用葉綠素含量，白色體可以用類胡蘿卜素的含量或堿性焦磷酸酶的活性；乙二醛循環體可以用異檸檬酸裂解酶的活性；內質網可以用對抗霉素 A 不敏感的細胞色素 C 還原酶；質膜可以用 K+/ATPase 活性等來確定各種細胞器對線粒體的污染程度。經過仔細地密度梯度離心后，一般來自胞質的污染比較少，即使有污染，也可以通過測定乙醇脫氫酶的活性來確定。有關各種標志酶活性的測定方法可以參考文獻 [ 1 ] 和文獻 [7]。其他線粒體純度相關事項可以參考注釋 7。3.6 線粒體完整性鑒定分離出的線粒體可以通過各種方法來確定其結構的完整性。外膜的完整性通過其對外源細胞色素 C 的不通透性來確定。施加非離子變性劑（0.05% m/V Triton X-100 ) 前后細胞色素 C 氧化酶......閱讀全文
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗（二）
3.5 純度鑒定可以通過各種細胞器標志性酶的活性來確定線粒體的污染程度。過氧化物酶體可以鑒定過氧化氫酶、羥基丙酮酸還原酶或者乙二醇氧化酶的活性；葉綠體可以用葉綠素含量，白色體可以用類胡蘿卜素的含量或堿性焦磷酸酶的活性；乙二醛循環體可以用異檸檬酸裂解酶的活性；內質網可以用對抗霉素 A 不敏感的細胞
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗
實驗材料黃化苗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒勻漿緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?清洗緩沖液 ?
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗
實驗材料黃化苗試劑、試劑盒勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材分光光度計實驗步驟在選好植物材料和勻漿緩沖液后，接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等（見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方法，或者
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗（一）
實驗材料?黃化苗試劑、試劑盒?勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材?分光光度計實驗步驟 在選好植物材料和勻漿緩沖液后，接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等（見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方
線粒體的分級分離實驗
實驗材料 線粒體儀器、耗材 離心機實驗步驟 1. ?將裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平后，以17 000 rpm 離心20分鐘，棄上清，留取沉淀物。2. ?加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化鈣液1 ml，用吸管吹打成懸液，以17 000 rpm 離心20
線粒體的分級分離實驗
高速離心法實驗材料線粒體 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?儀器、耗材離心機 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?實驗步驟 1. ?將裝有上清
線粒體的分級分離實驗——高速離心法
實驗材料線粒體儀器、耗材離心機實驗步驟1. ?將裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平后，以17 000 rpm 離心20分鐘，棄上清，留取沉淀物。2. ?加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化鈣液1 ml，用吸管吹打成懸液，以17 000 rpm 離心20分鐘。
橋粒的制備實驗_分級分離橋粒
實驗材料橋粒試劑、試劑盒尿素溶液儀器、耗材勻漿器實驗步驟1. 在最終的橋粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液，用玻璃/Teflon 勻漿器勻漿，用尿素溶液稀釋勻漿物使蛋白質濃度為 0.15 mg/ml，用 1 mol/L 的 Tris-HCl 調節溶液的 pH 值到 9.0 在室溫至少攪拌 1 小時。尿
植物莖的結構及其功能的觀察實驗
一、實驗目的 1. 了解芽的構造。2. 了解雙子葉植物莖的初生構造，次生構造及單子葉植物莖的構造。3．認識植物莖的輸導功能。二、實驗原理 芽是處于幼態而未伸展的枝、花或花序，也就是枝、花或花序尚未發育前的雛體。以后發展成枝的芽稱為枝芽；發展成花或花序的芽稱為花芽。枝芽的結構決定著主干和側枝的關系與數
植物的根的結構及其功能觀察實驗
一、實驗目的 1．了解根尖的內部構造。2．了解根的初生結構、初次生結構。3．掌握被子植物根尖的吸收分泌功能。二、實驗原理 從根的頂端到著生根毛的部位，叫做根尖，主根、側根和不定根都具有根尖。根尖是根中生命活動最活躍的部分，根的生長和根內組織的形成都是在根尖進行的。根尖一般分為根冠、分生區、伸長區和成
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要通過細胞勻漿和離心的方法分級分離細胞的組分，以了解其原理及過程。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過
細胞核與線粒體的分級分離
一、所需試劑及設備小白鼠、冰塊、玻璃勻漿器、普通離心機、臺式高速離心機、普通天平、光學顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刻度離心管、高速離心管、滴管、10ml量筒、25m1燒杯、玻璃漏斗、解剖剪、鑷子、吸水紙、紗布、蠟盤、平皿、牙簽。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
細胞核與線粒體的分級分離
? 一、原理??? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要掌握細胞核與線粒體的分級分離的實驗技術。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究亞細胞成分的化
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理?? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究
植物的根的結構及其功能的觀察實驗
一、實驗目的 1．了解根尖的內部構造。 2．了解根的初生結構、初次生結構。 3．掌握被子植物根尖的吸收分泌功能。 二、實驗原理 從根的頂端到著生根毛的部位，叫做根尖，主根、側根和不定根都具有根尖。根尖是根中生命活動最活躍的
植物整體結構的研究和異常結構的觀察實驗（二）
(2)根－莖連接取大豆、黃瓜和曼陀羅等任一種植物的幼苗，先區分幼苗的子葉、真葉、下胚軸、上胚軸和根，然后自根部開始，向上胚軸方向做徒手橫切片，每隔 1-2mm取一切片，按順序將切片逐一放于載玻片上（材料可擺放 2-3 排，容納不下時可放在另一張載玻片上）。然后加上鹽酸和間苯三酚溶液，待木
植物RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 TELiCl無水乙醇乙酸鈉氯仿儀器、耗材 勻漿器離心管離心機水浴鍋實驗步驟 1. ?研缽和研棒先用液氮冷卻，稱出15 g 凍結植物組織于研缽中（加液氮保持凍結）。2. ?用研棒磨成粉末，立即轉移到一個盛有150 ml，研磨緩沖液和50 ml TLE緩沖液平衡酚的500
植物RNA的制備實驗
酚/SDS法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒
線粒體基質的線粒體結構
線粒體基質 線粒體基質是線粒體中由線粒體內膜包裹的內部空間，其中含有參與三羧酸循環、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反應的酶等眾多蛋白質，所以較細胞質基質黏稠。蘋果酸脫氫酶是線粒體基質的標志酶。線粒體基質中一般還含有線粒體自身的DNA(即線粒體DNA)、RNA和核糖體(即線粒體核糖體)。 線粒體
細胞線粒體內部精細結構研究（二）
2、改良了傳統SIM方法產生衍射光柵的方法2D-SIM成像需要通過產生兩束互相干涉的光來形成三種不同偏振方向，且光強在空間上呈正弦變化的結構光。在傳統的SIM成像方法中，這一過程除了要依靠液晶硅基的空間光調制器（LCOS-SLM）對光相位進行調制之外，還需要一種特殊的光學器件來改變光的偏振方向——旋
線粒體的結構
線粒體由外至內可劃分為線粒體外膜（OMM）、線粒體膜間隙、線粒體內膜（IMM）和線粒體基質四個功能區。處于線粒體外側的膜彼此平行，都是典型的單位膜。其中，線粒體外膜較光滑，起細胞器界膜的作用；線粒體內膜則向內皺褶形成線粒體嵴，負擔更多的生化反應。這兩層膜將線粒體分出兩個區室，位于兩層線粒體膜之間
蕨類植物門、石松亞門、楔葉亞門觀察實驗
一、目的要求 通過實驗掌握石松亞門、楔葉亞門代表種類的形態結構和生活史；掌握石松亞門、楔葉亞門的主要特征以及與其它 亞門的區別。 二、實驗材料 石松孢子體；中華卷柏孢子體、孢子葉穗；問荊孢子體、莖橫切，孢子葉穗等。 三、實驗內容和方法 1．石松屬（Lycopodium）：觀察孢子體外形，石
蕨類植物門、松亞門、楔葉亞門觀察實驗
一、目的要求 通過實驗掌握石松亞門、楔葉亞門代表種類的形態結構和生活史；掌握石松亞門、楔葉亞門的主要特征以及與其它 亞門的區別。 二、實驗材料 石松孢子體；中華卷柏孢子體、孢子葉穗；問荊孢子體、莖橫切，孢子葉穗等。 三、實驗內容和方法 1．石松屬（Lycopodium）
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠試劑、試劑盒蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結締組織）盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中，反復
細胞核的分級分離實驗
實驗材料 小白鼠試劑、試劑盒 蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材 玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟 1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結締組織）盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?氯化鈣溶液 ? ? ?
植物細胞結構與植物徒手切片觀察試驗（二）
5.? 植物細胞的內含物觀察（1）淀粉粒?取馬鈴薯塊莖做徒手切片，先在低倍鏡下觀察，可見到其薄壁細胞中含有許多白色 的顆粒即淀粉粒。換高倍鏡觀察，可以看到淀粉粒的輪紋，并可找到具有兩個臍的淀粉粒。 （2）貯藏蛋白質取蓖麻種子，剝去種皮，用肥厚的胚乳做徒手切片。先把切片放入盛有純酒精的培養皿中洗滌數分
細胞和亞細胞提取物的制備實驗
實驗方法原理 對于細胞內蛋白的純化和特性分析，重要的是選擇一種有效的方法來破碎細胞或組織，使蛋白迅速地從胞內相對隔離的空間中釋放到緩沖液中，而該緩沖液應對所研究的蛋白的生物活性沒有影響。廣泛使用的破碎軟組織的方法之一是勻漿。在本方案中，討論了使用機械力勻漿組織：在 Potter-Elvehjem