殷平教授Nature子刊解析植物RNA編輯的分子機制
早在1989年研究人員就在植物中發現了RNA編輯的現象。2005年,第一個參與RNA編輯的蛋白因子被鑒定出來,發現它是一個PLS-type的PPR蛋白。近期來自華中農業大學作物遺傳改良國家重點實驗室的研究人員報道了RNA編輯關鍵因子MORF蛋白可以和PLS-type PPR蛋白相互作用形成復報道了RNA編輯關鍵因子MORF蛋白可以和PLS-type PPR蛋白相互作用形成復合物,并促進PLS-type PPR蛋白對靶標RNA的結合能力。同時報道了PLS-type PPR蛋白、MORF9蛋白及其復合物的晶體結構。 這一研究成果公布在Nature Plants雜志上,文章的通訊作者是殷平教授,博士后閆俊杰、研究生張群霞作為論文共同第一作者。 類似于在一篇WORD文檔中,會時常使用插入、刪除、替換等手段來修改文字信息,被稱為文檔編輯。在植物遺傳信息“天書”中,RNA編輯是指通過轉錄后特異位點核苷酸的插入、缺失及轉換等加工修飾手......閱讀全文
植物RNA提取實驗
實驗方法原理 獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結合多糖多酚并通過離心去除,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質去除,
植物病毒RNA提取
大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。? 一、材料? 提純TMV病毒液(10mg/ml)。? 二、設備? 冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。? 三、試劑? TE-飽和酚:氯仿(1:1),氯仿
提取植物rna方法
提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。 眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因
植物RNA提取實驗
直接研磨法 液氮研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過裂解液β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結合多糖多酚并通過離
分離植物總RNA
實驗概要認識真核生物RNA的組成及分離的原理;學習RNA提取過程中抑制RNA酶活性的方法。實驗原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一個典型的真核細胞約含有10-5~10-6mg的RNA,其中80-85%為rRNA,其余15-20%主要由各種低分子量RNA組成(如tRNA、核內小分子
植物RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 TELiCl無水乙醇乙酸鈉氯仿儀器、耗材 勻漿器離心管離心機水浴鍋實驗步驟 1. ?研缽和研棒先用液氮冷卻,稱出15 g 凍結植物組織于研缽中(加液氮保持凍結)。2. ?用研棒磨成粉末,立即轉移到一個盛有150 ml,研磨緩沖液和50 ml TLE緩沖液平衡酚的500
植物總RNA的分離
實驗概要認識真核生物RNA的組成及分離的原理;學習RNA提取過程中抑制RNA酶活性的方法。實驗原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一個典型的真核細胞約含有10-5~10-6mg的RNA,其中80-85%為rRNA,其余15-20%主要由各種低分子量RNA組成(如tRNA、核內小分子
植物RNA的制備實驗
酚/SDS法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
植物病毒(plant-viruses)RNA提取
?? 大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。 一、材料 提純TMV病毒液(10mg/ml)。 二、設備 冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。 三、試劑 TE
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN
植物組織總RNA的提取
實驗概要由于RNA分子的結構特點,容易受RNA酶的攻擊反應而降解,加上RNA酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA酶,人的皮膚、手指、試劑、容器等均可能被污染,因此全部實驗過程中均需戴手套操作并經常更換(使用一
酚/SDS法制備植物RNA
試劑、試劑盒 液氮 研磨緩沖液TLE 緩沖液平衡酚)氯仿IiCl 溶液 (DEPC 處理)乙酸鈉 (DEPC 處理) 無水乙醇DEPC 處理水儀器、耗材 Folytron 勻漿器(BrinkmarmPT10 35)實驗步驟 一 材料與設備1) 液氮2) 研磨緩沖液 18mol/LTris,0.09m
酚/SDS法制備植物RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 液氮 研磨緩沖液 TLE 緩沖液平衡酚) 氯仿 IiCl 溶液 (DEPC 處理) 乙酸鈉 (DEPC 處理)
植物總RNA的提取規程
一、實驗目的掌握植物總RNA提取的原理和方法二、實驗原理RNA的提取:破壞細胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去鹽離子。RNase是一類生物活性極其穩定的酶類,能耐高溫、耐酸、耐堿,高壓滅菌處理也不能使其完全失活。在提取RNA實驗中,要盡量抑制RNase的活性。?DEPC(焦磷酸二乙酯)是很強的RNas
植物中的RNA沉默額定分類
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類:?以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS);?以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(tra
植物總RNA的提取實驗技術
一、實驗目的 通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法 二、實驗原理 RNA是一類極易降解的分子,要得到完整的 ?RNA,必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍,可溶解蛋白質,破壞細胞結構,使核蛋白與核酸分離,失活RNA酶,所以RNA從細胞中釋
植物中的RNA沉默的分類
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類: 以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS); 以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(tra
植物RNA提取實驗——直接研磨法
植物RNA提取可應用于:(1)進行植物分子生物學方面的研究;(2)進行Northern雜交分析、純化mRNA以用于體外翻譯或cNDA文庫構建等研究。實驗方法原理通過裂解液β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結合多糖多酚并通過離心去除,然后用乙醇調節結合條件
植物RNA提取實驗——液氮研磨法
實驗方法原理獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結合多糖多酚并通過離心去除,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質去除, 最后
2.2.1-酚/SDS法制備植物RNA
酚/SDS法比較適合于從RNA含量較豐富.易提取的植物材料中制備RNA試劑、試劑盒液氮研磨緩沖液TLE 緩沖液平衡酚)氯仿IiCl 溶液 (DEPC 處理)乙酸鈉 (DEPC 處理)無水乙醇DEPC 處理水儀器、耗材Folytron 勻漿器(BrinkmarmPT10 35)實驗步驟一 材料與設備1
植物RNA的分離(總RNA的分離和mRNA的分離)
1. 總RNA的分離總RNA分離的方法很多,常采用的是異硫氰酸胍和b-巰基乙醇這兩種RNase 抑制劑來抑制RNase的活性,同時,異硫氰酸胍與十二烷基肌氨酸鈉(sarcosyl)共同作用可以破壞核蛋白復合體,使RNA順利地解脫出來溶進緩沖液。由于RNA在堿性條件下不穩定,因而在整個提取過程中體
植物總RNA的快速提取與純化
一、原理RNA包括rRNA、tRNA和mRNA等,大部分通常是以核蛋白復合物的形式存在的。通過SDS、苯酚處理使蛋白質變性并沉淀。利用LiCl溶解雙鏈DNA的特性去除DNA,經乙醇沉淀得到總RNA。純度高、完整性好的RNA,即可用于Northern雜交、純化mRNA、cDNA合成和體外翻譯等進一步的
RNAplant植物RNA提取試劑使用說明
簡介:RNAplant試劑可從植物組織,特別是富含多酚或淀粉的植物組織中(如馬鈴薯塊莖,白松松針或嫩苗,和西紅柿葉等)提取高純度的總RNA。每100 ml可處理100 mg組織200次。保存條件:室溫運輸,4℃保存,可保存6-12個月。?準備試劑:液氮,研缽,無RNase離心管,5 M?NaCl(無
植物總RNA的提取實驗_研磨法
在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗方法原理在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞
植物組織RNA提取的要點與技巧
從植物組織中提取RNA 是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析,純化mRNA 以用于體外翻譯或建立cDNA文庫,RT-PCR及差示分析等分子生物學研究,都需要高質量的RNA 。因此,從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA 是順利進行上述研究的關鍵所在。從文獻報道上看
植物總RNA提取方法及過程介紹
目的:用于 Northern 雜交、純化 mRNA、RT-PCR 及 DDRT-PCR 等。材料:植物油嫩組織器官或種子萌發的幼苗。1、異硫氰酸胍法(1)試劑①異硫氰酸胍溶液:4mol/L 二異硫氰酸胍,25mmol/L 檸檬酸鈉(pH7.0),0.5%十二烷基肌氨酸鈉,0.1mol/L 巰基乙醇。
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
實驗方法原理 利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核酸酶 A。通過 CsCl 梯度離心,線粒體 RNA 沉
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核
多糖多酚植物RNA提取的利器
眾多文獻報道,許多植物由于未能有效地分離純化出其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面的研究進展。比如Northern雜交分析,體外翻譯分析或建cDNA文庫,RT-PCR及差異顯示分析等研究,都需要高質量的RNA。因此,提取純度高、完整性好的RNA是順利進行上述研究的關鍵所在。RNA提取的常見難