分光光度計波長精度和重復性的測試方法有哪些？

以下是分光光度計波長精度和重復性的常見測試方法：

波長精度的測試方法

• 利用標準物質：

• 氧化鈥溶液：配置一定濃度的 4% 氧化鈥的 10% 高氯酸溶液。將分光光度計的波長設置為 700 - 200nm 范圍，狹縫小于 1nm，以空氣為空白，調節透光率為 100%。取上述氧化鈥溶液，置于 1cm 石英吸收池中，放入樣品光路，以恰當的掃描速度制作氧化鈥溶液的吸收圖譜并打印出峰值，與標準值（氧化鈥溶液在特定波長下的已知吸收峰波長）相比較。重復測定三次，取平均值，計算波長準確度 1。

• 鈥玻璃校正片：其尖銳吸收峰主要有 279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2 和 637.5nm 等。測定方法與使用氧化鈥溶液類似，校正片使用前必須經過校正。將鈥玻璃校正片放在試樣池處，儀器波長從相應范圍掃描，譜圖上的峰值對應的波長與標準值比較，可得到波長精度 12。

• 利用特征波長光源：

• 元素燈（空心陰極燈）：如鎘（Cd）燈、鋅（Zn）燈、銦（In）燈、鎂（Mg）燈、硒（Se）燈、汞齊燈（Hg.Cd、Zn 三元素充在一只燈管內）等。這些元素燈具有特征波長，可用來測試分光光度計的波長準確度。例如，讓特定元素燈的光通過分光光度計，測量其特征波長處的實際波長值，并與已知的特征波長標準值對比 2。

• 溴鎢燈和光柵單色儀：將標定過的光柵單色儀和溴鎢燈（具有若干條已知標準譜線的相對光源）放在試樣池處，儀器波長從特定范圍掃描，譜圖上的峰值對應的波長即是波長準確度 2。

波長重復性的測試方法

• 多次測量取差值：

• 一種方法是在進行波長準確度測試時，取三次測試結果中的最大值與最小值之差作為波長重復性 356。

• 另一種方法是取三次測試的平均值，與三次測試中的最大值（或最小值）之差作為波長重復性 356。

• 固定樣品多次測量：選定一個標準樣品（也可用使用者自己任選的樣品），由同一個操作者，按照與波長準確度測試相同的條件（如儀器預熱時間、掃描速度等），進行 3 - 5 次測試。然后在得到的譜圖上選擇幾個特征吸收峰，計算在選定的測量次數內，各個峰值對應的波長的最大值與最小值之差，即為波長重復性 47。