HeLa細胞蛋白質組雙向電泳技術的建立

【摘要】目的：建立和優化HeLa 細胞蛋白質組分析所需的樣品處理方法和雙向電泳技術。方法：用三種不同配方的裂解液提取HeLa 細胞中的蛋白質，進行雙向凝膠電泳，用Amersham ImageMaster VDS- CL 型凝膠成像系統獲取凝膠圖像，以PDQuest
（7.4.0）軟件進行比較分析。結果：聯合使用硫脲和尿素有利于蛋白質的提取，增加堿性蛋白點的檢出數量；廣譜蛋白酶抑制劑的使用可大大增加雙向電泳可檢出的蛋白點數，同時使可檢出的堿性蛋白點明顯增加。結論：本文建立了HeLa 細胞雙向電泳分
析方法，提高了2- DE 圖譜中蛋白位點的分辨率和重復性，獲得了較為理想、清晰的雙向電泳圖譜，為其蛋白質組學進一步研究奠定了基礎。