免疫組化是利用抗原與抗體間的特異結合原理和特殊的標記技術，對組織和細胞內的特定抗原、抗體進行定位、定性、定量的一們技術。我們都是先進行免疫組化，在DAB染色后進行HE染色。既能看到免疫組化的結果，又能看到細胞的形態，CD34+免疫組化染色后是棕色的顆粒，效果很好。 1）做免疫組化的片子最好不要同時做HE染色，因為那樣會掩蓋陽性著色的結果；而且用蘇木素復染細胞核也是淡染，若要在免疫組化的片子上觀察形態學的改變，除非有非常典型的表現，一般是有很大的難度的。 2）你是培養的細胞做免疫組化嗎？如果是的話，那就每個樣本只有一張片子吧？唯一的辦法是進行免疫雙染，同時做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我覺得后者陽性便可以或多或少的獲得向肝細胞分化的證據。 3）用HE染色來識別造血干細胞向肝細胞分化，也就是說要看到肝細胞的典型形態學改變后才可以下結論。問題是：早期的肝細胞僅憑形細胞態學觀察并不能很容易的被識別。病理大夫看組織切片，重要的是看其組織學結構，對肝細胞也是這樣。如果單拿出來一個細胞，還是培養的細胞，染色后真的不容易區分。所以我覺得你設計的用HE染色來確定早期細胞向哪個方向分化不是很有說服力。 4）如果是切片，也就是說每個樣本可以有多張切片，那可以在連續切片上分別染CD34和AFP，拍照時選擇相同視野，也有一定說服力。但是還是不如雙染法更可靠。 5）用雙染最大的問題在于：這兩者都表達在胞漿中，染色容易相互覆蓋。所以在雙染的方法選擇上你還要再考慮一下，可不可以用免疫熒光雙染？這樣也很有說服力的