一.目的
本SOP規定了HBSAg酶聯免疫吸附實驗的程序和相應的操作.
二.范圍
HBSAg檢測
三.責任
實驗室操作人員嚴格按要求執行。
四.定義
無
五.背景
為使實驗結果準確無誤，需要技術員從第一步開始就按標準操作進行。
六.程序
本程序適用于乙型肝炎病毒抗原（HBSAg）診斷試劑盒。
(一).設備和材料
酶標儀: KHB ST-360
洗板機: KHB ST-36W
精確移液器:單通道可調移液器40-200ul一支
高品質蒸餾水
(二).試劑配制
將濃縮洗滌液加蒸餾水稀釋1000ml備用.
（三）.操作流程
1.每孔加入待測標本50ul，設陰陽性對照各兩孔，每孔加入陰性對照（或陽性對照）各1滴，并設空白對照1孔，質控1孔
2.每孔加入酶結合物1滴（空白對照孔除外），充分混勻,置37℃孵育30分鐘，洗板機洗板后扣干。
3.每孔加顯色劑A液B液各1滴，充分混勻，置37℃孵育15分鐘。
4.每孔加入終止液1滴，充分混勻。
5.用酶標儀讀數，取波長450/630nm，先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。
（四）結果判定
樣品OD值／陰性對照平均OD值≥2.1 判斷為陽性,否則為陰性
陰性對照OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05按實際OD值計算.
(五)注意事項
1、冷藏環境中取出的試劑盒應在室溫平衡30min后方可使用
2、使用前試劑應搖勻，并移去1∽2滴后垂直滴加
3.結果判定必須在反應終止后10分鐘內完成.
4.不同批號的試劑不可以混用。
5.待測標本不可用NaN3防腐，如需稀釋標本，請用小牛血清稀釋。
6．本試劑盒應視為有傳染性物質，請按傳染病實驗室檢查規程處理。
(六).完成實驗
1.處理廢棄物品,按照 “傳染病檢測實驗室安全管理作業指導書”要求行.
2.清理消毒工作區。
3.關閉儀器設置,為下次實驗做好準備。
（七）質控
1．每次實驗必須做外部質控，并將質控值填入質控圖。
2．根據質控值的位移，趨勢等情況及時糾正實驗偏差。
3．如質控值超過正負2S，本次實驗應重做。
4．質控血清有明確的的標記,保存在-20℃以下，分裝量夠一周使用。
5．所有儀器設備定期檢查校正，并有記錄。
6．所有儀器如有維修必須有維修記錄。
（八）記錄
1．所有實驗的原始記錄存檔。
2．所有記錄應規范登記在冊。
七．復查和修訂
每年復查，修訂一次
八．參考文件
HBSAg抗原診斷試劑盒
九．相關文件
無
十附件
無