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  • 發布時間:2011-01-19 15:16 原文鏈接: ABSCIEX成功參加首屆亞太國際生物分析最新進展研討會

      2011年1月11日晚,首屆亞太國際生物分析最新進展研討會舉辦前夕,ABSCIEX公司在上海浦東淳大萬麗酒店,舉辦了別開生面的會前酒會及報告演講。來自亞太地區生物分析領域的100余位專家們出席了酒會。這些專家大部分來自跨國藥企、CRO公司、和國內知名的研究機構,以及日本、韓國、印度、馬拉西亞等國家的研究者。

      與國外生物分析相關的酒會形式非常接近, AB SCIEX公司為大家準備了各式茶點、美酒。大家三五成群地聊天,很快便相互熟識,熱情交談起來。到場嘉賓們在這種歡快的氛圍中輕松地度過了一個半小時的時間。

    酒會現場

    酒會現場

      AB SCIEX公司亞太地區市場經理Matthew Grigg博士作為此次酒會的主持人,對大家的到來表示熱烈歡迎并祝愿首屆亞太國際生物分析最新進展研討會勝利召開。

    AB SCIEX公司亞太地區市場經理Matthew Grigg博士

      接下來,到場嘉賓仔細聆聽了AB SCIEX公司為大家安排的兩個演講報告。

     

      用于生物醫藥的LC-MS定量分析方法

    葛蘭素史克公司(GSK)副總裁Eric Yang博士,題目:LC-MS for the Quantitative Bioanalysis of Biopharmaceuticals

      首先來自葛蘭素史克公司(GSK)副總裁Eric Yang博士作為特約演講嘉賓,為大家帶來《用于生物醫藥的LC-MS定量分析方法》的報告。

      為什么要將LC-MS/MS用于蛋白質定量呢?Eric Yang博士給出了以下回答:LC-MS/MS可以縮短先導藥物開發的時間,提高實驗效率;LC-MS/MS開發配體結合測定新方法,無需使用特定的配體結合試劑;可用于代謝產物的定量分析。

      Eric Yang博士接下來列舉了運用LC-MS/MS對GSK1995057、GSK716155、GSK933776三種藥物進行定量分析的研究實例。GSK1995057是一種抗體治療藥物(分子量13 kDa),GSK716155(Syncria)是一種融合蛋白藥物,GSK933776(ant-beta amyloid)是單抗體藥物。

      GSK1995057定量分析研究中,由于在沒有特殊抗體結合情況下,傳統的ELISA方法很難在血漿中檢測到低含量的GSK1995057,并且抗體內源性物質將帶來高背景干擾。將高靈敏度、高選擇性的LC/MS/MS方法用于檢測猴子血漿中GSK1995057,當吸入輕微劑量,質量下限≤1ng/ml(76 pM);而用ELISA方法質量下限為0.35ng/ml;加上利用96孔板,整個LC/MS/MS方法便可以實現自動化,通量高(每3分鐘分析一個樣品)。試驗針對分子量13050的治療用dAb,選擇了分子量13076的內標蛋白,監測[M+2H]2+ - y2離子的通道。樣品采自大猴血漿(0.3 mL),用固相萃取后干燥和重組,然后進行還原/烷基化/酶解,最后用LC-MS/MS分析,最后獲得線性范圍為1 ~ 500 ng/mL,精密度達到要求。同時LC-MS/MS實驗還和ELISA做了對比實驗。

      Syncria(GSK開發的2型糖尿病治療新藥)在人類血清白蛋白(HSA)中含量可達到90%以上,人類血清蛋白內源性物質同樣為檢測帶來高背景干擾。Eric Yang博士在實驗中不僅用到ELISA方法還用到LC/MS/MS方法,藥代動力學研究數據顯示,LC/MS/MS方法測得的Syncria最大濃度值與ELISA方法結果相同,但是在消除相中濃度卻高出了ELISA方法測定值。Eric Yang博士懷疑是有代謝產物產生了。

      GSK933776實驗中,從CDR肽結合區(Fc區)尋找到一種獨特的肽作為替代肽段進行LC/MS/MS定量分析,得到了滿意的結果。

      報告最后,Eric Yang博士總結說,LC/MS/MS是對蛋白質治療分子定量分析的有效手段,是分析生物制藥化合物的有力工具;LC/MS/MS用于比較免疫在藥代動力學研究中可提供更多的信息。隨著LC/MS/MS定量生物分析方法開發,也應該對其加以規范,期望將來LC/MS/MS能同時完成藥代動力學和藥效學的測量。

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       AB SCIEX公司Qtrap 5500系統的MRM3定量分析定量分析

    AB SCIEX公司Johnny Cardenas博士

      來自AB SCIEX公司的Johnny Cardenas博士帶來的報告題目為《AB SCIEX公司Qtrap 5500系統的MRM3定量分析》。

      Johnny Cardenas博士首先提出了MRM3定量分析的概念。所謂MRM3掃描方式就是通過Qtrap 5500質譜系統與液相色譜相配合,在Q1選擇一個前體離子,在Q2中將該離子進行碎裂,與MRM掃描方式不同在于MRM3掃描方式是將所有的碎片離子聚集在線性加速離子阱中,之后,在離子阱中以高達10K或20KDa/Sec的速度掃描特定的二代碎片離子,從而獲得MRM3譜圖。

      用MRM3掃描進行定量分析的Qtrap 5500質譜系統,在Qtrap 4000質譜系統基礎上之上具有更高靈敏度、更佳碎片離子、超快的掃描速度以及MRM3掃描周期時間短等特點,這些遠比一級MRM掃描更具有優勢。

      那么,什么時候需要使用MRM3掃描方式呢? Johnny Cardenas博士給出的答案是:(1)MRM掃描背景噪音較高,或譜圖中有干擾峰存在;(2)通過更換流動相、優化液相色譜條件、選擇不同的MRM離子對、選擇不同的離子化方式等這些簡單方法無法消除背景噪音;(3)與背景噪音相比,沒有特定的MRM子離子可用,在遇到上述這些干擾和困難時,MRM3就是一種有效的定量策略。

      緊接著,Johnny Cardenas博士具體例舉了通過MRM3掃描方式定量檢測血漿中多肽藥物Exenatide、OATP2B1多肽藥物和血漿中前列腺特異性抗原(PSA)這三個例子。Exenatide在臨床上用于治療II型糖尿病,分子量為4186.6Da。通過選擇MRM和MRM3這兩種定量掃描方式進行比較,得出血漿樣品中的背景干擾影響了MRM的選擇性,定量下限(LOQ)大概是100ng/mL,而采用MRM3掃描方式完全消除了干擾物,LOQ提高了20倍以上。

      前列腺特異性抗原(PSA)是臨床診斷前列腺癌的主要指標,在臨床上通常采用ELISA的方法進行檢測,而采用MRM3得到了滿意的結果。接下來,Johnny Cardenas博士將MRM3掃描與MRM掃描作了簡單對比,譜圖結果顯示,MRM3掃描具備更佳的靈敏度以及將MRM3用于臨床生物標志物定量分析結果與傳統的ELISA方法具有良好的相關性。

      Johnny Cardenas博士最后為報告作了簡要的總結:當MRM掃描背景噪音較高,或譜圖中有干擾峰存在時, MRM3掃描定量分析是一種非常有效的手段;樣品量少情況下,MRM3掃描定量下限低;MRM3掃描可被用于小分子、多肽、生物標志物蛋白的檢測與定量。MRM3是Qtrap質譜系統獨有的掃描模式,線性離子阱的改進,使MRM3掃描成為Qtrap 5500 系統功能強大、十分有效的定量分析手段。

      總而言之Qtrap 5500是目前市場上具有最高性能的四極桿-線性阱雜交質譜系統。

      本網收錄產品

    QTRAP5500 四極桿-線性阱雜交質譜儀

    3200 Qtrap 四極桿-線性阱雜交質譜儀

    4000 Qtrap四極桿-線性阱雜交質譜儀

     

      抽獎活動

    抽獎活動

    頒發獎品,左為獲獎客戶,右為AB Sciex公司新上任的中國區業務總經理 劉文玉 先生

      報告結束之后,AB SCIEX公司還組織進行了抽獎活動,Matthew Grigg博士現場抽取了三位幸運嘉賓,AB Sciex公司新上任的中國區業務總經理 劉文玉 先生為每位嘉賓頒發了精美獎品,活動現場十分熱鬧。

           此次會議形式新穎,幾乎沒有提供任何可坐的地方,但是正是在這個無處可坐的廳堂里,來自世界各地的同行們可以自由交談,隨意組合,使氣氛格外熱烈。報告不多,短小精悍,給在場每位嘉賓都留下了深刻的印象。

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