3磷酸甘油酸激酶的測定實驗

酶樣品

三乙醇胺-NaOH 3-磷酸甘油酸 ATP NADH EDTA 硫酸鎂 3-磷酸甘油酸激酶 GAPDH

分光光度計

0.98 ml 實驗混合物

0.02 ml 酶樣品

25 ℃ 時于 340 nm 處吸收值降低，ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

試劑：

0.1 mol/L 三乙醇胺-NaOH，pH 7.6（三乙醇胺-HCl，Mr＝185.7；溶解 18.6 g 于 800 ml H₂O 中，用 1 mol/L NaOH 調至 pH 7.6，補充到 1 L）

0.1 mol/L 3-磷酸甘油酸（3-磷酸甘油酸，二鈉鹽，Mr＝230.0；230 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L ATP（二鈉鹽，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L NADH（二鈉鹽，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L EDTA（Mr＝292.2；292 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L 硫酸鎂（MgSＯ₄·7H₂O，Mr＝246.5；247 mg 溶于 10 ml 水中）

3-磷酸甘油酸激酶，來源于酵母（約 2000 U/mg）

GAPDH（3-磷酸甘油醛脫氫酶來源于兔肌肉，800 U/ml）