采用ELISA來定量測定結合的噬菌體

[器材和試劑]

● 洗滌緩沖液

● 結合緩沖液

● 辣根過氧化物酶(HRP)連接的抗M13單克隆抗體(mAb) (Amersham Biosciences)

● HRP底物㈠OPD(鄰苯二胺，o-phe-nylenediamine) (Sigma)或AT 【2，2-連氮基-雙-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸)，2，2’-azinobis(3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid)】 (Kinkegaard和Perry)

● 預先準備的噬菌體包被的微孔板

[方法]

1，每塊板用洗滌緩沖液洗滌3次。

2．用結合緩沖液將HRP聯結的抗M13單克隆抗體做1：5000稀釋，每孔加入100ul，室 溫下孵育30分鐘。

3．每塊板用洗滌緩沖液洗滌3次。

4．每孔加入lOOglOPD顯色，不超過15分鐘后用50ul 2．5mol/L的HzS04終止反應。5．檢測每塊板在492nm處的吸光度。