鉤狀效應又稱HOOK效應,即前后帶現象。由于抗原抗體比例失調,導致檢測結果出現假性低值甚至假陰性的現象稱之為鉤狀效應。鉤狀效應嚴重干擾標本的正常測定結果,稍有不慎就會對患者的治療方案產生嚴重的影響。
案例經過
某日接到臨床醫生的電話,被告知一名病人血β-hCG的檢驗結果與臨床并不一致。詳細詢問情況后查閱了該名病人前后幾次的檢驗結果及病史。
患者女,31歲因「停經3個月,陰道流血伴惡心1月」入院。B超示:子宮增大,宮腔內充滿混合型回聲(葡萄胎?流產?)。
該名患者在就診過程中一共進行了3次血β-hCG檢查,第一次在門診查血β-hCG 990mIU/mL,第二次在門診復查血β-hCG 787mIU/mL,入院行吸宮術后第三次檢查血β-hCG 210000mIU/mL。
分析過程
顯而易見,患者前兩次的檢測結果與臨床診斷確實不符。為了排除是否檢驗過程中出現的差錯導致結果異常,對該名患者的3個標本進行復查,復查的結果都與當日標本結果基本一致,到底是什么造成了前兩個標本的假性低值?患者為非正常妊娠,前兩次檢測結果明顯偏低,第三次的檢測結果卻接近250000mIU/mL,或許是因為β-hCG水平過高導致的鉤狀效應?
于是嘗試使用儀器的稀釋模式,將前兩次的血液標本稀釋200倍后進行檢測,結果發現2個結果都大于270000
mIU/mL,再用手工稀釋10倍,檢測出來的結果依舊顯示大于270000 mIU/mL,這就說明這名患者的實際血β-hCG大于270000
mIU/mL。而導致前兩次檢測結果假性偏低的原因便是鉤狀效應。
跟臨床匯報解釋了原因后,醫生反饋說因為前面連續2次的門診β-hCG結果相符合,所以雖然對結果表示疑惑也并未向檢驗科提出,不過因為較明顯的臨床癥狀和超聲檢查結果,并沒有影響到患者的入院診斷。在行吸宮術次日,復查該患者的血β-hCG已經下降到110000
mIU/mL,符合吸宮術后β-hCG下降的趨勢。
實驗室對于防范HCG鉤狀效應的改進
在正常的妊娠中,血β-hCG的水平范圍<250000
mIU/mL,此次測試用的貝克曼化學發光檢測系統可以避免β-hCG水平在1000000
mIU/mL之內的高劑量產生的鉤狀效應,這說明正常妊娠的血HCG極少發生鉤狀效應。但在妊娠滋養細胞疾病中,血β-hCG的水平可高達5000000,因此實驗室仍需要警惕儀器方面的局限性。
對于血β-hCG的檢測,吸取本次案例的經驗教訓,實驗室增加膠體金試紙條法進行HCG的初篩,初篩陽性的全部直接采用稀釋模式檢測,同時聯系廠家將直接稀釋模式沒有結果的測試自動加測原倍測試,初篩陰性的標本則手動選擇儀器的原倍模式進行測試。
出現鉤狀效應時該如何處理標本?
除了HCG檢測,實驗室中采用雙位點免疫方法檢測的項目,例如垂體泌乳素、類風濕因子、肌紅蛋白等都可能會發生鉤狀效應。
由于鉤狀效應發生的不可預見性,及時發現結果的假陰性很重要。在免疫檢測中,實驗室常采取的措施有稀釋法、二步法、金標法等,而同步稀釋法是減少鉤狀效應發生的最簡便最直接的方法,免疫檢測中稀釋法誤差小更接近真值,方法也易于普及,且適用于不同規模的實驗室。