薄層色譜點樣選購指南、操作技巧、注意事項（二）

（二）帶狀點樣

當樣品溶液體積大、濃度稀時，采用CAMAG Linoamt Ⅳ型自動點樣設備進行帶狀點樣。定量分析的點樣范圍為1-99μl，制備型分離點樣范圍為5-490μl，作定量標準曲線時，可由同一標準溶液，自動點上不同體積的標準液，故快速簡便，利用內裝的微處理器編序操作，簡單易行。使用時樣品溶液吸在微量注射器中，點樣器不接觸薄層，而是用氮氣將注射器針尖的溶液吹落在薄層上，薄層板在針頭下定速移動點成0-199mm的窄帶。帶狀點樣展開后的斑點不僅分辨率明顯高于點狀點樣，而且精密準確，為定量分析提供最佳條件。

（三）自動點樣

Automatic TLC Sampler Ⅲ型（ATS Ⅲ）全自動點樣裝置結合了現代最先進的電子及機械技術，能進行點狀或帶狀點樣，采用先進計算機編程控制，靈活多用，點樣量為10nl-50μl，可隨意設定點樣規范，可應用于單向、雙向、環形或向心色譜展開，高度自動化的點樣使定量分析結果準確。點樣參數可與Scanner Ⅱ掃描儀的CATS掃描分析軟件連用，令定量分析工作達到高度自動化。

（四）接觸點樣

當樣品溶液粘度較大或點樣體積要超過100μl時，用毛細管點樣就有困難，Fenimore設計的接觸點樣法適用于這類樣品的點樣，美國制造的Clarke Contact Spotter就是這種接觸點樣器，見圖7-3-2。在帶有抽氣孔的凹形塊的上方覆蓋一片涂有疏水性物質的聚氟化物薄膜（a），當減壓抽氣時薄膜凹陷（b），此時將樣品溶液點在凹槽處（c），然后用氮氣吹去大部分溶劑（d），再將濃縮后的樣品液滴與高效薄層板的吸附劑層接觸（e），此時樣品就定量地轉移到薄層上。

1988年Kaiser對以上各種點樣方式進行了比較，總結其優缺點見表7-3-1、圖7-3-3。

表7-3-1 各種點樣方式的比較 

圖7-3-3中A-F為最常用的毛細管或注射器點樣：A—一次性數毫米長的薄壁玻管；B—長5-60mm，內徑為0.2-0.05mm的熔融石英管，用機械手操作；C—封在玻璃管中的鉑銥合金管（100nl,200nl），可精確點樣，生物樣品點樣后可用火焰清潔，見圖7-3-4；E—微量注射器，機械控制，接觸板面點樣；F—同E，用步進馬達控制操作；G—同E，樣品溶液用氣體噴到薄層板上；H—同E，完全用計算機控制點樣；I、K、L—借泵系統點樣，用于高壓平面液體色譜（HPPLC）；M—為Fenimore的固態樣品環形轉移器。

用管狀點樣器上樣的誤差來源是由于點樣時薄層表面的損傷，溶液“爬壁”效應使外壁樣品的沉積、樣品的記憶效應以及管中的微小氣泡等，見圖7-3-5。
點樣誤差的大小與樣品的溶解度，溶液的表面張力，溶劑的粘度、揮發性和極性、點樣所耗費的時間、薄層板的質量（粒度、均勻度、薄層厚度、粘合劑的性質）等有關。