(一)檢驗藥品
(1)檢驗藥品的名稱:鹽酸環丙沙星。
(2)檢驗藥品的來源:市場購買或送檢樣品。
(3)檢驗藥品的規格、批號、包裝及數量:根據藥品包裝確定,并記錄有關情況,檢驗合格后方可使用。
(二)質量標準
(1)檢驗依據:《中國藥典》(2010版)二部720頁“鹽酸環丙沙星”:本品為1 -環丙基- 6 -氟- 1,4-二氫-4一氧代-7-(1-哌嗪基)- 3 -喹啉羧酸鹽酸鹽一水合物。按無水、無溶劑物計算,含C17H18FN3O3不得少于88.5%。
(2)鑒別:稱取本品與環丙沙星對照品適量,分別加0.1mol/L鹽酸溶液適量(每5mg環丙沙星加0.1mol/L鹽酸溶液1mL)使溶解,用乙醇稀釋制成每1mL中約含環丙沙星1mg的溶液,作為供試品溶液與對照品溶液;另取環丙沙星對照品與氧氟沙星對照品適量,加0.1mol/L鹽酸溶液適量(每5mg環丙沙星加0.1mol/L鹽酸溶液1mL)使溶解,用乙醇稀釋制成,每1mL中約含環丙沙星1mg與氧氟沙星1mg的溶液,作為系統適用性試驗溶液;照薄層色譜法【《中國藥典》(2010版)附錄V B】試驗,吸取上述三種溶液各20μL,分別點于同一硅膠GF254薄層板上,以乙酸乙酯-甲醇-濃氨溶液(5 : 6 : 2)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈254nm或365mm下檢視。系統適用性試驗溶液應顯兩個完全分離的斑點,供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液主斑點的位置和顏色相同。
(3)《中國藥典》(2010版)附錄V B薄層色譜法:取適宜濃度的對照品溶液與供試品溶液,在同一薄層板上點樣,展開與檢視,供試品溶液所顯主斑點的顏色(或熒光)和位置應與對照品溶液的斑點一致。
按各品種項下要求對實驗條件進行系統適用性試驗,即用供試品和對照品對實驗條件進行試驗和調整,應達到規定的檢測靈敏度、分離度和重復性要求。
(三)儀器、試藥準備及試液的配制
1.儀器的準備
紫外-可見分光光度計、硅膠GF254薄層板、電子或分析天平(感量0.1mg)、燒杯(10mL)、量筒(10mL)、量瓶(50mL)、展開缸等。
2.試藥的準備
鹽酸、乙醇、乙酸乙酯、甲醇、濃氨水、鹽酸環丙沙星。
(四)檢驗過程
1.檢驗步驟
(1)系統適用性試驗溶液配制:稱取環丙沙星對照品與氧氟沙星對照品各50mg,置同一燒杯中,加0.lmol/L鹽酸溶液10mL完全溶解,轉移至50ml量瓶中,用少量乙醇多次洗滌玻璃棒和燒杯,并把洗滌液轉移至容量中,加乙醇定容,搖勻。
(2)供試品溶液配制:稱取本品50mg,置燒杯中,加0.1mo/L鹽酸溶液10mL完全溶解,轉移至50mL量瓶中,用少量乙醇多次洗滌玻璃棒和燒杯,并把洗滌液轉移至容量瓶中,加乙醇定容,搖勻。
(3)對照品溶液配制:稱取環丙沙星對照品50mg,置燒杯中,加0.1mol/L鹽酸溶液10mL完全溶解,轉移至50mL量瓶中,用少量乙醇多次洗滌玻璃棒和燒杯,并把洗滌液轉移至容量瓶中,加乙醇定容,搖勻。
(4)測定:吸取上述三種溶液各2μL,分別點于同一硅膠GF254薄層板上,將適量的展開劑倒人展開缸內,密封15min。溶劑蒸氣預平衡后,迅速將薄層板放入展開缸內,展開劑不能沒過原點。展開劑上行展開10~15mm時,取出,晾干,將薄層板放在紫外光燈254nm下觀察主斑點的位置和顏色。
(5)記錄:拍照保存或使用薄層掃描儀掃描記錄。
2.討論
本品含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環,在254nm波長處有紫外吸收并有特定的顏色;并且與氧氟沙星的極性有一定差異,有很好的分離度。因此,可以應用薄層色譜法對其進行鑒別。
(五)檢驗結果
1.檢驗結果記錄
檢驗結果記錄在下表中。
項目 | R1 | 顏色 |
系統適應性試驗溶液 | ||
環丙沙星樣品溶液 | ||
環丙沙星對照品溶液 |
2.結果判斷
(1)結果判定依據:系統適用性試驗溶液應顯兩個完全分離的斑點,供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液主斑點的位置和顏色相同。
(2)判定原則:如果主斑點的位置和顏色符合要求,則該項檢查判為“符合規定”。
3.檢驗原始記錄
鹽酸環丙沙星的薄層色譜圖。
4.檢驗報告書