董夢秋：ObservingProteinUnfoldingUsingCrosslinkerbyLCMS／MS

　　分析測試百科網訊 2020年9月15日，2020年中國質譜學會質譜網絡研討會（2020CMSS）進行到第二天，由北京生命科學研究所董夢秋研究員、中國科學院生態環境研究中心汪海林研究員、同濟大學田志新教授、中國醫學科學院藥物研究所張金蘭研究員；吉林大學藥物代謝研究中心顧景凱教授、軍事醫學科學院放射與核輻射醫學研究所馬百平研究員；中國科學院長春應用化學研究所宋鳳瑞研究員等國內知名質譜界學者為大家帶來精彩報告。

　　北京生命科學研究所 董夢秋研究員

　　題目：Observing Protein Unfolding Using a New, Fast-reacting Cross-linker Followed by LC-MS/MS Analysis

　　由北京生命科學研究所董夢秋介紹團隊在交聯質譜研究中所取得的成果。董夢秋表示，交聯質譜的核心是使用交聯劑形成蛋白間的共價交聯，從而形成不同肽段的相互連接。通過質譜分析后，可以得到各自肽端的分子信息，進而得到蛋白相互作用區域、空間折疊等信息。自建立以來，交聯質譜發展迅速，在蛋白質組學中得到廣泛應用。僅可以得到蛋白相關信息外，交聯質譜技術也可以幫助冷凍電鏡技術建立分子模型、定位蛋白二硫鍵位置、找出蛋白構象狀態間的差異等。

　　盡管交聯質譜分析性能強大，但傳統的NHS交聯劑存在反應慢、易水解反應等問題。為此，團隊與合作者共同開發全新DOPA交聯劑，利用氨基基團等避免了NHS上述問題。與DSS交聯劑對比發現，雖然DOPA得到交聯肽段對數量少，但對蛋白的吻合度更好。此外，DOPA交聯劑在正常反應條件下，可在10秒鐘基本完成交聯反應，在0℃低溫、酸性條件下反應結合效率更高。利用這些特性，團隊成功探索了蛋白動態展開、折疊過程，第一次看到了蛋白構象隨時間的變化。