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  • 發布時間:2019-04-10 11:05 原文鏈接: 藥物的鎮痛作用實驗

    藥物的鎮痛作用實驗可以用于:篩選可以選擇性抑制和緩解各種疼痛,減輕疼痛而致恐懼緊張和不安情緒疼痛的藥物。

    實驗方法原理小鼠的足底光滑裸露,無毛,適于熱刺激致痛模型。若將小鼠置于溫度55℃±0.5℃的金屬熱板上,則其“舔后足”現象可以作為出現疼痛反應的指標。通過考察疼痛反應的出現時間(痛閾),可以反映鎮痛藥的療效。然而,熱板法致痛模型主要用于篩選麻醉性鎮痛藥,并不適用于篩選解熱鎮痛藥,后者可使用化學性致痛模型進行評價。

    嗎啡為中樞鎮痛藥,屬于阿片類藥物,主要作用于u阿片受體。水楊酸鈉為外周解熱鎮痛藥,其鎮痛作用與抗炎作用密切相關。本實驗通過熱刺激致痛模型,比較了嗎啡及水楊酸鈉鎮痛作用機制的差異。
    實驗材料

    小鼠(昆明種)雌雄各半

    試劑、試劑盒

    鹽酸嗎啡溶液4%鹽酸水楊酸鈉(乙酰水楊酸)溶液苦味酸生理鹽水

    儀器、耗材

    電熱板注射器天平

    實驗步驟

    1. 篩選小鼠 將小鼠置于溫度55℃±0.5℃的金屬熱板上,測定其疼痛反應(舔后足現象)的出現時間,共測定2次,每次間隔5min。若出現疼痛反應的時間在10s至30s之間,則視為合格。共篩選出9只小鼠。

    2. 分組 先將小鼠逐一稱重,再按照體重由小到大(或由大到小)排序。按照簡化隨機原則分為3組(甲、乙、丙),每組3只。

    3. 小鼠腹腔注射給藥(15ml/kg) 甲組為0.1%鹽酸嗎啡溶液,乙組為4%鹽酸水楊酸鈉(乙酰水楊酸)溶液,丙組為生理鹽水。記錄給藥時間。

    4. 觀察 給藥15,30,45,60min后分別使用熱板法測定疼痛反應出現時間(痛閾),若置于熱板上60s內仍未出現疼痛反應,則均視為60s。

    5. 計算痛閾提高百分率

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    注意事項

    1. 小鼠性別選擇:由于雄性小鼠陰囊下垂,陰囊皮膚可接觸熱板,并對疼痛較為敏感,可能影響實驗結果,故本實驗中選擇雌性小鼠。

    2. 若小鼠在熱板上60s內仍未出現疼痛反應,亦要將其從熱板上移開,以免燙傷。

    3. 熱板法為評價藥物鎮痛作用的常用方法,其優點在于裝置簡便、對小鼠損傷小、且實驗動物可反復利用。除熱刺激致痛模型外,鎮痛藥的其他篩選模型亦包括:機械刺激、電刺激、化學刺激等方法。熱刺激、機械刺激及電刺激致痛模型均適用于篩選麻醉性鎮痛藥,而化學刺激致痛模型(扭體法)適用于篩選解熱鎮痛藥。

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    其他

    鎮痛機制:痛覺向中樞傳導過程中,痛覺刺激感覺神經末梢并釋放Glu和SP,作用于相應受體而完成痛覺沖動向中樞的傳遞引起疼痛。內源性阿片肽由特定的神經元釋放后可激動感覺神經突觸前、后膜上的阿片受體,通過G-蛋白偶聯機制,抑制腺苷酸環化酶、促進K+外流、減少Ca2+內流,使突觸前膜遞質釋放減少、突觸后膜超極化,最終減弱或阻滯痛覺信號的傳遞,產生鎮痛作用。

    嗎啡類藥物通過激動脊髓膠質區、丘腦內側、腦室及導水管周圍灰質μ受體,模擬內源性阿片肽而發揮鎮痛作用,作用于邊緣系統和藍斑的阿片受體,則可減緩疼痛所引起的不愉快、焦慮等情緒和致欣快。

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