實驗方法原理 生長素(吲哚乙酸)能促進燕麥胚芽鞘細胞的伸長。在切去頂端的芽鞘切段斷絕了生長素來源的情況下,切段的伸長在一定范圍內與外加生長素濃度的對數呈線性關系,因此,可以用一系列已知濃度的生長素溶液培養芽鞘切段,繪制成生長素濃度與芽鞘伸長的關系曲線,以鑒定末知樣品的生長素含量。
實驗材料 小麥燕麥種子
試劑、試劑盒 IAA溶液磷酸-檸檬酸緩沖液
儀器、耗材 培養皿濾紙細玻璃絲鑷子簡易切割器刻度吸管帶方格紙的玻璃板恒溫箱搪瓷盤暗室簡易切割器
實驗步驟
一、材料和設備
小麥或燕麥種子
培養皿,濾紙,細玻璃絲,鑷子,簡易切割器,刻度吸管,帶方格紙的玻璃板,恒溫箱,搪瓷盤,暗室。
簡易切割器可用木,鋼或有機玻璃和兩片雙面刀片制成,兩刀片間距離為6毫米。
10-3 M IAA溶液:精確稱取 17.5 毫克吲哚乙酸,溶于含有2%蔗糖的磷酸-檸檬酸緩沖液中,并以該溶液定容到100 ml 。
含2%蔗糖的磷酸-檸檬酸緩沖液(pH5.0):取K2HPO41.794 克,檸檬酸 1.019 克,蔗糖 20 克,溶于1000 ml 蒸餾水中。
二、實驗步驟
選品種純而健全的小麥或燕麥籽粒100粒,浸入飽和的漂白粉溶液中,數小時后取出用蒸餾水洗凈播種在有潔凈濾紙或石英砂帶蓋的搪瓷盤中,為使胚芽鞘長得直,可將種子排齊,種胚向上并一律朝向一側,將盤斜放成45?角,使胚傾斜向下,盤中適當加水并加蓋,放在暗室中生長,室內溫度保持25℃,相對濕度85%。
播種后三天,當胚芽鞘長約25-35毫米時,精選芽鞘長度一致的幼苗50株,用鑷子從基部取下芽鞘,用切害蟲器在帶方格的玻璃板上切下離芽鞘頂端3毫米,長度為5-6毫米的切段(見圖8)50段,立即放入含有2%蔗糖的磷酸緩沖液中(0.01 M ,pH4.5),浸泡1-2小時,以洗去內源生長素。