一、材料和設備
1. 植物材料:龍頭花(Antirrhinu M M ajus)。早晨采摘帶剛開放花的花序,插入盛有水的容器中。
2. 設備:顯微鏡;恒溫箱;毛筆;鑷子;刀片;煤氣燈;玻璃小杯;蓋玻片;載玻片;4cm 培養皿;9cm 培養皿;8 ml 燒杯;50 ml 燒杯;吸量管;滴管。
3. 試劑:4%瓊脂;40%蔗糖溶液;0.04%H3BO4溶液;4%酵母提取物溶液
二、實驗步驟
1. 花粉的培養
(1)在直徑5 M M ,高5 M M 玻璃小杯口上涂上凡士林或羊毛脂,使固定于一干燥的載玻片上,環內放2滴水。共做4個這樣的裝置。
(2)于8 ml 的小2燒杯中配制培養基1(見表7-1),用滴管將1滴培養基滴于一干凈的載玻片上,冷卻后,用毛筆將少許龍頭花的花粉撒于培養基上,然后將蓋玻片帶有花粉的一面反蓋在上面的小環內。
(3)于另一個8 ml 的燒杯中配制培養基2,其操作同步驟2。
(4)于另一個8 ml 的燒杯中配缺點培養基4,其操作同。
(5)用50 ml 燒杯配制培養基3,取1滴于蓋玻片上,操作同上。
(6)把剩余的培養基3分別倒于二個4cm 培養皿中。將其中一個培養皿放入盛有冷水的9cm 培養皿中(水不可溢入小培養皿中),使其底部培養基先冷卻,凝固,上層培養基仍處于溶膠狀態。將已準備好的龍頭花柱頭及其他雌蕊組織小心地埋于溶膠中,待溶膠冷卻后撒上少許花粉。在另一培養皿中不均勻地撒上洗少許龍頭花的花粉。
將以上(2,3,4,5,6)花粉培養物置25℃恒溫箱中。
2. 營養條件的觀察:10 M in后,將各小環中培養物取出,顯微鏡下觀察比較花粉萌發情況。
3. 集體效應的觀察:1h后,取花粉不均勻分布的培養皿,比較花粉密處和稀處的花粉萌發情況。
4. 向化性的觀察:1h后,取出埋有雌蕊組織的培養皿,觀察雌蕊組織周圍花粉管生長情況。
三、結果
1.選擇不同營養條件下有代表性的花粉萌發視野觀察結果并繪圖,比較萌發情況。
2.分別選取培養皿中花粉密處和稀處各3個視野計算花粉萌發的百分率。
3.觀察并繪出埋有雌蕊組織的培養皿中龍頭花的花粉管生長向化性圖。 展開 |