1. 電極拉制程序中具體應該如何控制。在參數設定的摸索中，是否需要每次都用顯微鏡檢測，還是另有更易操作的方法.
答：不同的拉制儀拉制參數的設置不盡相同，你需要閱讀說明書，參數中主要是設定拉力（對于P-97拉制儀，只需要設置Velocity，可不用設定Pull）與溫度。一般第一步拉制電極頸部，溫度要比第二步高（對于P-97拉制儀，溫度的設定需要先測量Ramp值），拉力不要過大，以保證頸部較短；第二步拉制尖端，一般要使溫度低些，拉力大些。一般都是通過顯微鏡查看電極尖端，這很簡單，并不復雜！最好是拋光，這樣就在拋光儀顯微鏡下查看。注意拋光后的電極尖端開口會變小，故在拉制電極時，尖端開口要大些。檢查電極還有其它方法，如“氣泡數法”，也可用放大器通過測量電阻來查看。
2. Rm＝4πr2Rin？似乎Rin是一個用細胞大小標化的膜電阻，那為什么不用電容Cm來標化而用這個什么4πr2？細胞形狀各異，Cm是個公認的膜面積的指標，電流密度不就是用Cm標化的嗎？盼回答，同時希望能將Rin的意義再多講一點，謝謝
答：（1）一定要注意不要拘泥于Rm和Rin這兩個符號，文獻中常混用，但實際上表示的大多是Rin。通常我們所說的“膜電阻”是指“膜輸入阻抗Rin”，但也有人用來指Rm。（2）你可以用Cm來計算膜面積，實際上這也正是我們的做法，用來估算細胞大小，用于對通道電流幅度進行標化，但我們從來不用它計算膜電阻Rm（也稱為“固有膜電阻”）。Rm的計算公式是數學理論上的，并沒有多少應用的價值，我們很少發現有使用Rm的（雖然符號用Rm）。（3）實際上，Rin反映的當然就是膜電阻，它被稱為膜輸入阻抗（或膜輸入電阻），也時常被稱為“膜電阻”（這正是使人們產生混淆的原因！），是膜的被動反應參數之一。所謂被動反應是指膜上離子通道沒有開放時，膜所表現出的電纜特性。膜的被動反應參數還包括膜電容、軸漿電阻等。全細胞記錄時，給細胞膜施加一系列刺激方波（多為超極化），在離子通道沒有開放的情況下測定跨膜電流，根據歐姆定律可求出Rin。當大量離子通道開放時，膜對電流的阻力急劇降低，測試脈沖電壓與通道電流之間不滿足歐姆定律，無法測量Rin，也沒有了測量的意義。
3. 請教什么是Channel availability？
答：Channel availability指在排除失活情況下，能夠開放的某通道的多少，通過全細胞電流幅度的大小來反映。例如，海馬神經元Na通道的channel availability可因乙酰膽堿M受體的激活而降低，表現為Na通道電流幅度的降低。
4. 什么是window current，我知道是激活曲線和失活曲線的重疊。但是我有一個疑問，比如電壓依賴的T型鈣通道，書上說在windonw current的時候有持續性的鈣內流，但是T性鈣通道不是有時間依賴性的失活嗎？怎么會有不失活的電流呢？
答：如果將通道的穩態激活曲線與失活曲線作在一個圖上，則激活曲線與失活曲線之間交叉部分的電流就是window current，在這個電壓范圍內，有一些通道并沒有完全失活，仍能被打開，有一定的開放概率。T性鈣通道是有時間依賴性的失活，但還有很小的部分失活非常緩慢，此即window current，它是一些快速失活通道的動力學特征。對于T型鈣通道，其window current維持了一個緊張性去極化，對動作電位的連續發放產生影響，當然，不同細胞中的T通道其作用不盡相同。
5. 使用Clampex 8.0記錄配體門控離子通道電流，protocol 如何設置?
答：需要事先在Lab Bench中設定好Channel序號和Signal名稱。在Edit Protocol中選擇Gap-free模式，采樣頻率可用5kHz，選好Input和Output。先在Clampex中啟動記錄（Record），然后誘發電流，可用Time Tag作誘發標記。