在培養過程中,ASCs 可在很長時間內保持未分化狀態。ASCs 具有成纖維細胞樣形態,胞內缺乏脂肪細胞中所見的脂滴。體外擴增后,ASCs 的表型會發生改變,主要體現在細胞表面蛋白和細胞因子表達的變化。ASCs 的表型與骨髓和骨骼肌來源的干細胞相似。
免疫組化染色發現,誘導的 ASCs 可以表達神經細胞標志物,包括 NeuN、MAP2、tau、β-Ⅲ微管蛋白和 NSE, 可表達的神經膠質細胞標志物,包括膠質纖維酸性蛋白 (GFAP)、波形蛋白(Vimentin) 和 S100。但體外神經誘導的 ASCs 不表達少突膠質細胞的標志物 04。表達神經表型標志物的 ASCs 所占的比例相對較高,如表達 NeuN 的 ASCs 占誘導細胞的 80%。這種現象表明在這個異質細胞群體中,大部分細胞都或多或少有一定程度的神經分化。此外,一些細胞共表達 NeuN 和 GFAP, 提示至少在短期培養體系中,部分 ASCs 具有向神經細胞和神經膠質細胞分化的潛能。來源:《人干細胞培養》
| 實驗材料 | 脂肪干細胞 |
|---|---|
| 試劑、試劑盒 | 神經誘導培養基PBSA |
| 儀器、耗材 | 培養瓶 |
| 實驗步驟 | (a)吸去培養基。 (b)加人PBSA潤洗細胞。 (c)加入神經誘導培養基,將培養瓶放回溫箱 |
| 其他 | 培養基配方: DMEM 1×、EtOH溶的丁基羥基苯乙醚36μg/ml(0.2 mol/L)、氯化鉀5 mmol/L、水溶的丙戊酸2 mmol/L、DMSO溶的毛喉祐(forskolin)10μmol/L、EtOH溶的氫化可的松1μmol/L、水溶的胰島素5μg/ml、青霉素100 U/ml、鏈霉素100μg/ml |