臨床細菌檢驗工作的基本要求和技術
對臨床細菌檢驗人員的要求
1． 負責鑒定及簽發報告的主管技術人員應通曉診斷細菌學的全面知識。
2． 一般細菌室工作人員均應具備3． 細菌傳染、消毒、滅菌的知識。
4． 通曉細菌室守則，5． 并嚴格遵守。
6． 負責人應不7． 斷更新知識，8． 了解細菌學檢驗的新進展。
9． 定期或隨時與臨床醫師聯系，10． 主動參與臨床病例討論，11． 了解病情及治療情況，12． 達到細菌檢驗與臨床的密切13． 聯系。
14． 工作人員應定期進行健康體檢及必要的預防接種，15． 增強自身抵抗能力。
二、工作人員守則
在細菌室工作人員應注意，既不要給室內帶來污染，也不要被室內的微生物感染。工作人員必須遵守以下規則：
穿專用的工作衣、帽入室；必要時應戴口罩。
不允許無關人員進入實驗室。
室內禁止飲食、吸煙、閑談等非專業活動。
養成在室內手不觸及口、臉、頭發及軀體的習慣。
操作中不可說話，以免口中飛沫污染標本。
每次完成工作和離開實驗室前，應用肥皂洗手，接觸了致病菌類，須用消毒劑消毒手。
個人物品不許帶入室內。
當工作環境被細菌培養物污染，必須用適當的強消毒液潑撒覆蓋污染物，并報告主管人員采取必要的措施。
工作人員被細菌培養物污染，應用弱或中等消毒劑清洗，必要時應給予藥物治療，并向主管負責人報告，進一步采用特殊措施。
基本染色方法
染色的第一步是制作涂片。菌液涂片時，用接種環沾取菌液點在載玻片上，標本可直接在玻片上涂布。菌落涂片時，先取生理鹽水 1滴，置玻片上，用接種針挑取菌落，在鹽水中涂布。涂片時必須注意應輕輕操作。猛烈的動作會改變菌細胞原有的排列形式，或造成細菌鞭毛脫落，影響結果的準確性。制備的涂片應自然干燥，并經火焰固定，固定溫度不宜過高，以玻片背面接觸手背不燙為準，否則可能使細胞形態改變。將固定后的涂片進行染色。
一、革蘭染色
本染色是最基本的染色法，可用于標本涂片或菌落涂片。染色結果將細菌分為革蘭陽性(紫色)和革蘭陰性(紅色)兩類。
試劑
1. 結晶紫溶液
A液： 結晶紫 2g
95％乙醇 20ml
B液： 草酸銨 0.8g
蒸餾水 80ml
需在用前24h將A液、B液混合，過濾后裝入試劑瓶內備用。
2．碘液
碘 1g
碘化鉀 2g
蒸餾水 300ml
碘與碘化鉀混合并研磨，加入幾毫升水，使其逐漸溶解，然后研磨，繼續加入少量蒸餾水至完全溶解。最后補足水量。
也可用少量蒸餾水，先將碘化鉀完全溶解，再加入碘片，待完全溶解后，加水至300ml。
3．脫色液：95％乙醇。
4．復染液
A. 貯存液： 沙黃 2.5g
95％乙醇 100ml
B. 應用液： A液 10ml
蒸餾水 90ml