細胞名稱：PK-15(豬腎細胞)
細胞別稱： PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15
細胞貨號: SNL-131
生長特性: 貼壁
培養條件: DMEM+10% FBS+1% P/S
培養環境: 空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
細胞簡介: PK-15細胞是由Stice·E于1955年從成年豬的腎臟中分離后建系的，是PK-2a細胞的克隆系。PK-15細胞豬圓環病毒（PCV）抗原陽性，表達纖溶酶原激活劑、角蛋白，可用于多種病毒的增值及特性研究。電鏡觀察發現，PK-15細胞內有C-型病毒顆粒存在，是研究C-型病毒的材料。美國農業部的外國動物疾病診斷實驗室已經確定ATCC CCL-33沒有感染霍亂病毒或非洲豬瘟病毒，可以用來篩選這些病毒。
PK-15(豬腎細胞)特點
01 細胞貼壁較強
細胞貼壁略偏強，消化時易出現消化時間偏長現象，注意一定要消化到細胞可以輕輕吹下，再加終止液終止消化；
02 細胞顆粒比較多
該細胞培養過程中代謝會產生較多顆粒物，細胞內部及細胞周邊可以明顯看到很多顆粒，此為該細胞正常現象，并不代表細胞狀態不佳或污染；消化操作不規范、培養條件不適等會導致細胞顆粒進一步增加，嚴重的可能會出現細胞不長甚至死亡，對環境和操作要求偏高；
細胞顆粒較多時可以收集細胞后低速離心并用PBS重懸后再低速離心，重復1-2次后再接種到新的培養瓶中；
03 細胞消耗培養基偏快
細胞培養基消耗速度偏快，必須多加點培養基培養細胞，T25瓶加10-12ml完全培養基，10cm皿加12-15ml，2-3天換液一次；
細 胞 收 貨 攻 略
常溫細胞
1.T25瓶收貨后，拆開外包裝，用75%酒精消毒T25瓶表面，放37℃培養箱靜置4h以上；
2.吸走大部分培養基并留10-12 ml，顯微鏡下拍照保存細胞狀態照片，觀察細胞密度，若細胞密度大于80%即可按比例傳代（首次傳代比例建議1：2），若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續培養至細胞密度80%以上再進行傳代培養；
凍存細胞
1.細胞收貨后盡快開箱檢查，若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱（2-3天內復蘇）短期保存或液氮中長期保存，若干冰完全揮發建議立即復蘇細胞并聯系銷售人員解決；
2.凍存細胞建議盡快復蘇一管培養檢查，以免超出售后期，復蘇步驟參考復蘇攻略；
3.復蘇一管細胞出現異常及時聯系銷售人員，在專業技術支持的指導下進行下一步操作；
TIPS:
1.細胞收貨出現漏液、培養瓶破損、干冰完全揮發等異常情況時，及時拍照聯系銷售人員；
2.該細胞運輸過程中由于條件不適，顆粒可能會增多，一定要充分平衡細胞后再處理，有條件的建議放培養箱過夜再處理細胞；
3.尚恩生物T25瓶發貨的細胞內含對應細胞的完全培養基，可以收集原裝培養瓶內培養基經1500rpm離心5min后，取上清于4℃保存用于后續細胞培養；
細 胞 傳 代 攻 略
1. 先盡量吸干凈T25瓶原培養基，再加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
2. T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層，將培養瓶放入37度培養箱消化；
3. 消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養基終止胰酶消化；
4. 混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
5. 加新的完全培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里，補足完全培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
TIPS:
1. 該細胞對消化時間偏長，注意略微延長消化時間；
2. 對于消化細胞程度，客戶如果經驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：胰酶首先復溫到室溫后加入細胞，放入37度培養箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復操作直至能夠輕柔的吹下細胞；
3. T25瓶加10-12ml完全培養基，10cm皿加12-15ml，2-3天換液一次。
4. 細胞收貨后首次傳代建議按1：2傳代，后續培養可以視具體細胞生長狀態和密度情況決定傳代比例；
5. 傳代后24h建議觀察細胞并換液一次去除死亡細胞；