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  • 發布時間:2021-12-23 16:35 原文鏈接: 硝基呋喃衍生原理

    硝基呋喃類原型藥在生物體內代謝迅速,無法檢測。但其代謝產物因和蛋白質結合而保證長時間穩定存在。所以一般以硝基呋喃類藥物代謝物為目標分析物的檢測,來達到檢測硝基呋喃類藥物殘留量的目的。

    檢測前處理
    在檢測前一般需要對樣品進行處理,一般分為洗滌、水解和衍生化及凈化等處理步驟,下面以國家標準檢測方法(GB/T20752-2006)和行業標準方法(SN/T 1627-2005)為例介紹一下檢測前處理的一般步驟。

    洗滌

    GB/T20752-2006:2g均質好的樣品,15ml的甲醇-水(2+1),混勻1min,4000rmp離心,棄掉上清液。

    SN/T 1627-2005:1g組織,不用洗滌。

    水解和衍生化

    GB/T20752-2006:加入20ml 0.2M鹽酸,加入0.3ml的衍生化試劑(75mg 2-硝基苯甲醛溶于10ml二甲基亞砜,0.05M),37℃避光振蕩16h。

    SN/T 1627-2005:加入30ml 0.125M鹽酸,加入1ml的衍生化試劑(100mg 2-硝基苯甲醛溶于12.5ml二甲基亞砜),37℃避光振蕩16h。

    凈化

    GB/T20752-2006:加入5ml 0.1M的磷酸氫二鉀,并用1M氫氧化鈉調pH到7.4,離心上清液過HLB柱,5ml乙酸乙酯洗脫,40 ℃ 吹干,定容到1ml(10ml乙腈+0.3ml,用水定容到100ml)

    SN/T 1627-2005:加入4ml 1M的氫氧化鈉,并用1M鹽酸和0.1M氫氧化鈉調pH到7-7.5,3000rmp離心10min,上清液倒入250ml的分液漏斗中,殘渣用5ml水洗, 3000rmp離心10min,上清液也倒入250ml的分液漏斗中,加乙酸乙酯40ml,振搖1ml,靜置3min,重復提取1次,合并乙酸乙酯,通過裝無水硫酸鈉的漏斗過濾至雞心瓶中,50 ℃ 旋蒸至3-5ml,再轉移到試管中, 50 ℃ 吹干,定容至1ml(0.1%乙酸:乙腈:甲醇 3:3:2)。

    檢測方法
    經過對樣品檢測前的處理后,就可以對樣品中的硝基呋喃類藥物代謝物殘留量進行檢測,有關豬肉、禽肉、水產品中硝基呋喃類藥物代謝殘留量測定的方法,國家有相應的檢測標準,也有相關的行業標準,另外文獻報道也有一些檢測方法。國家和行業標準檢測方法基本是液相色譜法或液相色譜-串聯質譜法,區別在于提取溶液和凈化方法上有差異,以及外標法或內標法定量的不同,檢出限大多為0.5ug/kg。文獻報道有固相萃取液相色譜-質譜法和液相色譜-串聯質譜組合法,其中前者與國家、行業標準檢測方法的檢出限相同,后者檢出限能達到0.03 ug/kg。

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