1、酸度
取鹽酸平陽霉素,加水制成每1mL中約含4mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為4.5~6.0。
2、溶液的澄清度與顏色
取鹽酸平陽霉素5份,各10mg,分別加水2mL使溶解,溶液應澄清無色,如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃,如顯色,與黃色或黃綠色2號標準比色液(通則0901第一法)比較,均不得更深。
3、有關物質
照高效液相色譜法(通則0512)測定。
供試品溶液:取鹽酸平陽霉素適量,加水溶解并稀釋制成每1mL中含2.0mg的溶液。
對照溶液:精密量取供試品溶液2mL,置100mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。
系統適用性溶液:取鹽酸平陽霉素兩份,每份約8mg,一份加1mol/L鹽酸溶液1.0mL,另一份加30%過氧化氫溶液1.0mL,搖勻,放置1小時后,混合,加水2mL,搖勻,得每1mL中約含鹽酸平陽霉素2.0mg及其酸降解物(約含10%)或其氧化降解物(約含15%)的混合溶液。
色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以己烷磺酸鈉溶液(取己烷磺酸鈉7.53g與乙二胺四醋酸二鈉3.72g,加0.08mol/L醋酸溶液使溶解并稀釋至1000mL,用氨溶液調節pH值至4.3)為流動相A,以甲醇-乙腈(7:3)為流動相B,按下表進行線性梯度洗脫,檢測波長為254nm,進樣體積為20μL。
系統適用性要求:系統適用性溶液色譜圖中,出峰順序為酸降解物峰、平陽霉素峰、氧化降解物峰(相對保留時間分別約為0.94、1.0、1.1),平陽霉素峰的保留時間約為20分鐘,酸降解物峰與平陽霉素峰之間的分離度應大于1.0,平陽霉素峰與氧化降解物峰之間的分離度應符合要求。
測定法:精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。
限度:供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,最大雜質峰面積不得大于校正后對照溶液主峰面積的3.5倍(7.0%),其他單個雜質峰面積不得大于校正后對照溶液主峰面積的2.5倍(5.0%),各雜質峰面積的和不得大于校正后對照溶液主峰面積的7.5倍(15.0%),小于對照溶液主峰面積0.025倍的峰忽略不計。(對照溶液主峰面積除以供試品的含量,即為校正后的對照溶液主峰面積)。
4、干燥失重
取鹽酸平陽霉素,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥至恒重,減失重量不得過6.0%(通則0831)。
5、銅鹽
照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。
供試品溶液:取本品約15mg,精密稱定,置10mL量瓶中,加0.1mol/L鹽酸溶液3mL使溶解,加入3%阿拉伯膠溶液0.4mL,搖勻,再加二乙基二硫代氨基甲酸鈉試液2mL,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻。
對照溶液:精密量取銅對照溶液[精密稱取硫酸銅(CuSO4?5H2O)1.965g,置1000mL量瓶中,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5mL,置500mL量瓶中,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度。每1mL中含銅0.005mg]3mL,置10mL量瓶中。自“加入3%阿拉伯膠溶液0.4mL"起,制備方法同供試品溶液。
空白溶液:精密量取0.1mol/L鹽酸溶液3mL,置10mL量瓶中,自“加入3%阿拉伯膠溶液0.4mL"起,制備方法同供試品溶液。
測定法:以空白溶液作為空白,取供試品溶液與對照溶液,在450nm的波長處分別測定吸光度。
限度:含銅量不得過0.1%。