1. 用包被液稀釋豚鼠抗兔IgM 抗體至l0 (g/ml,加至40 孔板,每孔0.2 m1。置濕盒37 ℃1 小時,再置4 ℃過夜。用洗滌液洗三次。
2. 用稀釋液稀釋待檢血清,然后加至40 孔板,每孔0.2 ml。置濕盒,37 ℃1 小時,用洗滌液洗三次。
3. 用稀釋液將乙腦病毒抗原稀釋至50 個血凝單位,對照抗原用同法稀釋。分別加入40 孔板中,每孔0.3 ml。置濕盒4 ℃過夜,用洗滌液洗三次。
4. 用稀釋液稀釋辣根過氧化物酶標記的兔標JBEV IgG,加至40 孔板,每孔0.2 ml,37 ℃l 小時,用洗滌液洗三次。加鄰苯二胺(OPD)底物液,每孔0.2 ml。避光置室溫30 分鐘。加2M H2SO4 0.05 m1,終止反應。
用分光光度計測出各孔OD 值,波長選擇495 nm。
4. 結果
P/N (3.0 為血清JBEV IgM 抗體陽性。
標本平均OD 值- 空白對照OD
陰性對照OD 值一空白對照OD
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