【摘要】目的：探討溶血現象對生化檢驗結果的影響，分析其主要原因，最大限度避免溶血現象的發生，提高檢驗結果準確度。方法：采用長征復星CS-800生化分析儀，檢測患者溶血與正常血清的11項生化指標。按照儀器使用說明書將正常血清與溶血血清分別測定十次，取其均值對比，并進行統計學分析。結果：心肌酶類生化項目檢測結果明顯高于正常血清(P<0.01),而其他項目檢測結果影響甚微(P>0.05)。結論：溶血標本對檢測結果產生較大影響，不利于臨床醫生對患者病情判斷，應加強采血人員責任意識，規范化采血，提高檢驗結果的準確性，必要時重新采血。
【關鍵詞】：溶血 生化檢驗 采血
溶血，是指紅細胞破壞，血紅蛋白溢出細胞外。常見于人為因素如不規范采血，或由于保存血液及運送分離過程中引起血細胞破裂，另一種是體內溶血，如溶血性貧血等。由于生化檢測多采用分光光度法，因此溶血標本使細胞內容物混入血清，干擾光譜波長，一定程度下影響生化檢測結果，不利于臨床醫生診斷。由此可見了解溶血現象對于檢驗項目的影響具有重要的意義
1、標本與方法：
1.1、制取標本：抽取我院50名體檢者5ml靜脈血液，分別置于兩排試管中，每支試管2.5ml，其中一排試管采取人工方法使其溶血并貼置標簽作對照組。
詢問體檢者有無既往病史，是否至少空腹8小時采血等，排除一切影響因素。
兩排試管室溫下放置30min后以3000r/min速度離心，10min后分離血清。正常血清無肉眼可見的黃疸，溶血，脂血現象。若對照組血清為淡紅色，則標本溶血。
1.2、操作方法：采用長征復星CS-800生化分析儀，試劑由上海復星長征醫學科學有限公司提供。標本檢測前對生化分析儀做室間質控，檢測每項試劑是否合格，如發現失控（在+-2SD范圍外）應及時校正。按照儀器操作規程，分別對ALT、AST、GLU、TG、BUN、Cr、UA、CK、CK-MB、LDH、K + 等11項生化項目進行檢測與比較。每份溶血血清和正常血清分別測定10次，標本各指標取均值，將正常標本均值與溶血均值對比觀察。
統計學方法：數據采用SPSS11.0統計軟件處理，均數±標準差表示計數資料，t檢驗表示組間計量資料，方差檢驗表示計數資料比較，有統計學意義的范疇為P＜0.05。
2、結果
經測定后溶血標本中GLU略低于正常血清，ALT、BUN、Cr、UA、TG結果檢測較正常血清有輕微變化，差異無顯著性（P>0.05）。K+ 、AST、CK、CK-MB、LDH測定結果明顯高于未溶血標本，差異非常顯著性（P<0.001）。溶血血清與正常血清生化測定對比觀察結果見表1。
表1 標本未溶血、輕度溶血、重度溶血狀況下測得的結果均值 | ||||
項目 | 溶血前（均值） | 溶血后（均值） | 結果 | |
ALT | 21.4 | 22.1 | ↓ | |
AST | 27.6 | 42.8 | ↑ | |
GLU | 5.62 | 5.37 | ↓ | |
TG | 2.27 | 2.33 | ↑ | |
BUN | 4.9 | 5.3 | ↑ | |
Cr | 65 | 72 | ↑ | |
UA | 275 | 283 | ↑ | |
CK | 68 | 183 | ↑ | |
CK-MB | 19 | 37 | ↑ | |
LDH | 118 | 352 | ↑ | |
K+ | 3.9 | 5.1 | ↑ |
注：ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ、ＬＤＨ單位為Ｕ／Ｌ， ＧＬＵ、ＴＧ、ＢＵＮ、Ｋ＋單位為ｍｍｏｌ／Ｌ，ＵＡ、Ｃｒ單位為ｕｍｏｌ／ｌ
3、分析
AST、CK、CK-MB、LDH等心肌酶均屬于細胞內酶，細胞內濃度遠高于細胞外濃度，其中AST在紅細胞中的活性是血漿的38倍，LDH胞內濃度為胞外3000倍，輕度溶血即帶來顯著影響，因此溶血標本不適用于心肌酶檢測。K+胞內外濃度差約30倍，溶血對K+影響也較明顯，電解質其他項目如Na+、Cl-因細胞外濃度遠大于胞內濃度，影響甚微。蛋白類，甘油三酯，尿素，尿酸，肌酐影響則不明顯。另外，因溶血導致LDH清濃度升高，直接影響糖酵解，進而使血糖濃度偏低。
4、討論
溶血對標本影響機理分析
1、試劑多采用速率法，溶血使血紅蛋白從紅細胞中釋放，通過非特異性吸附，影響過氧化物酶，從而引起測量誤差。
2、細胞溶血使細胞內液釋放出來，稀釋待測酶濃度，帶來輕微誤差。
3、腺苷酸酶從紅細胞中釋放出來之后，所有的ATP肌酸類酸轉化酶幾乎都受到影響，這屬于紅細胞內外液之間的反應。
4、細胞內容物如脫氫酶一定程度上干擾其他酶生化反應。
原因及對策
溶血原因：溶血主要分為體內溶血和體外溶血。體內溶血分物理因素（如大血管手術），生物因素（惡性瘧疾），藥物毒性反應、配血不合引起的輸血反應等因素。體外溶血又分為物理因素（如機械性破壞、冰凍）、化學因素（如血樣接觸活性劑）、代謝性因素（如遺傳性疾病引起的紅細胞脆性增加）。較為常見的有采血帶帶捆綁過久，采血不慎刺穿靜脈導致采血過程不順，注射器抽吸過猛導致氣泡生成等。
因此，采血要求規范化操作，最大限度避免溶血現象發生。臨床上，為對于工作人員須做到以下幾點
1、扎實掌握基本功，保證靜脈采血有較高的成功率。尤其是老年人，肥胖者盡量一次性采血成功。靜脈穿刺多選用肘部正中靜脈，嬰幼兒肘部靜脈較細，應進行頸部采血。
2、嚴格管理采血器具，禁止使用不合格產品，采血前檢查標本試管。
3、采血帶捆扎不宜過緊，盡可能使采血過程中捆扎時間<1min。
4、采血前務必將酒精及患者汗液擦拭干凈，避免血液接觸而溶血。
5、靜脈采血應避開水泡，膿腫等皮膚損傷部位，防止混入組織液。
6、對靜脈隱藏較深的成年患者，不宜過分拍打靜脈。
7、采血時使針頭斜刺入靜脈，抽拉活塞桿動作要慢，使血液緩緩流入注射器，防止注射器內出現氣泡。
8、若不慎穿血管導致血液抽吸不暢，應重新采血，。
9、新采集的血液不宜立即分離血清，室溫下靜止30min后離心，使離心機轉速在3000r/min以下。
10、血液放置時間不宜超過4小時，如延誤生化檢測，可先將血液離心后分離血清，避免紅細胞破裂造成溶血。
11、需要保存或運送的血液避免強烈震蕩。
綜上所述，溶血會引起一些生化檢測項目結果的誤差，對臨床診斷造成不利影響。因此，提高從業人員的技術水平和專業精神、降低檢驗人員的失誤和提高檢驗結果的準確性和可靠性對更好地服務于臨床有著非常重要的意義。