活細胞的標記步驟以及注意事項是什么耐心看完下文你就會有了答案。
用蒸餾水配制貯存液,4攝氏度避光保存。標記時用蒸餾水稀釋100倍。
2.吸去細胞培養基。
3.用PBS(+)沖洗細胞3次。
4.將細胞于Hoechst標記液中室溫下孵育10一30分鐘。
S.吸去標記液,并用PBS(+)沖洗3次,然后固定蓋玻片:
注意事項
當Hoechst 33342結合至DNA后,其激發光波長約為343ml ,發射光波長約為483nm。對察時應使用紫外光濾光器。對共焦顯微術而言,可用氫離子激光的紫外光作為激發光。
Hoechst 33343與DAPI相比,其優點是膜可透性的,因此可用于活細胞,而不需要對細胞固定及作透化處理。
Hoechst 33342結合富含AT區域的DNA小溝部分,結合后熒光大為增強。
Hoechst 33342亦可染固定的細胞,程序同DAPT
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