實驗材料 DNA
試劑、試劑盒 乙酸鈉乙醇
儀器、耗材 EP管低溫離心機移液器-70度冰箱
實驗步驟
酶切前確定待切樣品的濃度, 并選擇合適的限制性內切酶和配套Buffer。
2. 在離心管中加入如下成分：
10×Buffer 1μl
待切樣品 xμl
酶 0.5-1μl
————————————
加水補足10μl
3. 混勻樣品并短暫離心使樣品沉于管底。
4. 將離心管置于37℃中溫育1-3hr，若待切樣品為PCR 產物，則可將反應時間適當延長。
5. 用未酶切的質粒作為對照，瓊脂糖電泳鑒定酶切結果。
注：當酶切樣品用于回收而不是鑒定時，可按比例適當加大反應體積。雙酶切可選用二者活性都較高的Buffer 或者通用Buffer，但要注意不能有星反應。