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  • 發布時間:2024-07-12 16:14 原文鏈接: 毛細管電泳法的芯片等電聚焦分離系統介紹

      芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。

      Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,在等電聚焦電泳模式下優化了,分離長度及電壓條件,最終在長1.9 cm的通道內于1.5 min內分離了綠熒光蛋白和R藻紅蛋白,分離電壓為500 V。Cui等在PDMS芯片上采用等電聚焦分離模式成功分離了組綠熒光蛋白、異藻青蛋白和藻紅蛋白。該作者還報道,通過改變樣品和分離介質中添加劑甲基纖維素的濃度,可以改變完成蛋白質分離所需要的通道距離,Tsai等通過采用六甲基二硅氧烷等離子聚合膜修飾玻璃芯片通道的方法抑制蛋白質吸附,在等電聚焦的分離模式下分離了藻青蛋白(pI:4·65)、血紅蛋白(pI: 7.0)和細胞色素C(pI:9·6)3種蛋白質混合物,分離在3 min內完成,分離效率為19 600塔板/m。Huang等在進行芯片等電聚焦分離蛋白質時,采用在兩性電解質溶液中加入羥甲基纖維素作為添加劑的方法來抑制蛋白質的吸附。

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