1、腹部觸診
輕型者可無陽性體征，或左下腹部和下腹部有壓痛，嚴重者出現腹部壓痛、腹肌緊張，可觸及如硬管狀的降結腸或乙狀結腸。
2、實驗室檢查
（1）糞便檢查 肉眼可見有血、膿、黏液，急性期鏡下可見大量紅細胞、白細胞。大便培養無致病菌。
（2）血液檢查 急性期中性粒細胞增多，血沉增快。患者多有輕中度貧血。
（3）免疫學檢查 活動期測免疫球蛋白，可見IgG、IgM、IgA增高，以IgG明顯增高最為多見。
3、內鏡檢查
是潰瘍性結腸炎最重要的檢查手段，但急性期和重型患者應暫緩進行。鏡下見腸段黏膜充血、水腫、粒狀突起、多發性點狀或斑片狀淺小糜爛或潰瘍，表面有黏液或黃白苔。腸黏膜較脆弱，鏡角擦過易出血，由于水腫和淋巴組織增生，可見假性息肉。
4、鋇劑灌腸
早期可見腸黏膜皺襞紋理紊亂，腸管邊緣模糊，重者腸管邊緣可見毛刺狀或鋸齒狀變化。晚期結腸袋消失，腸管呈狹長的鉛管狀。急性期和重型患者忌做鋇劑灌腸。
5、.黏膜病理檢查
見黏膜炎性細胞浸潤，異性上皮細胞增生，腺體排列異常，上皮纖維化，有隱窩形成等。