怎么通過反向pcr技術在質粒中插入一個dna片段質粒在你插入的片段上游是有啟動子區域的,在插入的時候有時由于是單酶切或者TA克隆或者平末端克隆,你是無法確定基因插入的方向的.如果你插入序列的ATG起始密碼子是跟在啟動子后面,你就是正向插入,如果你插入序列的終止密碼子是在啟動子后面,那你就是反向插入了,這時候你插入的序列是不能夠正常表達的
反向PCR(inversePCR)反向PCR是一種多聚合酶鏈式反應(PCR)應用的方法,可使已知序列的核心區邊側的未知RMA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的RMA,以產生適合于PCR擴......