平皿干裂縮水,與瓊脂的保水性、傾注培養基的量、平皿的透氣性、培養箱條件等因素均有關系。
a.瓊脂:不同的瓊脂在保水性方面略有差異,保水性差的瓊脂可能會出現嚴重縮水或者干裂。
b.培養基的量:傾注的培養基越少,平板越薄越容易干裂。按照GB4789要求,傾注融化的培養基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3 mm(直徑90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL瓊脂培養基)。如果平板需儲存,或者培養時間超過48 h或培養溫度高于40 ℃,則需要傾注更多的培養基。
c.平皿的透氣性:平板的密封性越好,保存和培養過程中培養基失水越少。雖然增加平板的密封性可以減少水份流失,但并非密封性越高越好,一些需氧型微生物(如銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌等),在密閉環境中生長較差,需要良好的透氣性才能較好的生長。
d. 培養條件:培養箱是影響平皿干裂問題的關鍵因素之一。大型的培養箱為了保證內部溫度均一,通常帶有較強的鼓風系統,內部有較強的空氣流動。而氣流越強,則越容易導致平皿失水。而對于一些沒有鼓風系統的小型培養箱,則很少會出現平皿干裂現象。在培養箱內擺放平皿時,應盡量避開風口氣流大的位置,同時遠離培養箱內部發熱板。
綜上所述,在遇到平板干裂縮水問題時,可通過增加平板培養基厚度、培養箱內增加擋板降低氣流或避開風口、選擇合適透氣性的平皿、選擇適宜瓊脂的的培養基等進行綜合的考慮分析,制定對應的方案和措施。