1. 實驗原理
基于尿液中革蘭氏陰性細菌將硝酸鹽轉化成亞硝酸鹽的原理。
2. 標本采集
2.1 標本采集前病人準備:以清晨第一次尿為宜,急診患者可隨時留取。
2.2 標本種類:新鮮尿液
2.3 標本要求:采集患者尿液標本時,盛尿液的容器必須清潔干燥,要求留取中段尿。
3. 標本儲存:從排出到檢測應在2小時內完成。如不能及時送檢或分析,應置4℃下冷藏保存,但冷藏時間不得超過6小時。
4. 標本運輸:室溫運輸。
5. 標本拒收標準:細菌,經血,白帶,精液,糞便污染標本不能作測定。
6.
試劑
6.1 試劑名稱 Combur10 TestR M
6.2 試劑廠家 德國 Roche 診斷試劑公司
6.3 包裝規格:100Test/kit
6.4 試劑盒組成:試紙條:100條
6.5 試劑儲存條件及有效期:試劑盒貯存于2-30℃條件下,可使用至試劑盒所標示有效期。
7. 儀器設備
7.1 儀器名稱:羅氏尿液分析儀
7.2 儀器廠家:Roche
7.3 儀器型號:MiditronR Junior II
7.4 儀器校準程序:在使用過程中,一般是兩周校準一次,如超過此期限,儀器會提示“Please Calibrate”(請校準)。通過測定內部參比塊,環境溫度和光學系統的改變都可被補償。當條件改變很大時,比如參比塊腐蝕或發光二極管的亮度變暗,儀器將打印出一個錯誤信息;校準條是有穩定特征的灰白色試條,這些校準條只能使用一次。校準前,應先清潔試紙托盤與運輸臂。步驟為:在“READY—<START>”顯示時,按<Calibrate>鍵,放上校準條。再按<Calibrate>
8. 操作步驟:
8.1 按<START>鍵,顯示“Prepare Strip”,此時試條筒中拿出試條。
8.2 約4秒鐘后,顯示“Dip Strip 1”,同時綠燈閃爍,將試條浸入尿樣中。
8.3 當顯示“Insert Strip 1”,把試條放在試條托盤上,此時綠燈亮,若要人工輸入顏色,按<Color>鍵,再按<Set>鍵,選擇相近的顏色,最后按<Enter>鍵確認,同樣也可人工輸入濁度。
8.4 約20秒后,顯示“Dip Strip 2”,然后重復以上過程。
每一個測量完成后將自動打印出結果。
9. 結果判斷:粉紅色斑點或粉紅色反應為陽性結果。
10. 質量控制:質控尿液的應用:用人工質控尿液進行空內質控,低濃度質控液亞硝酸鹽應為(-),高濃度質控液亞硝酸鹽應為(+)。
11.
參考范圍:陰性
12. 臨床意義:陽性結果提示尿液中存在革蘭氏陰性細菌,并提示尿中所存在的細菌數目在10 5個/ml以上。
13. 操作性能:快速簡便,特異性強,靈敏度高,重復性好。
14. 方法局限性
14.1 粉紅色反應為陽性結果,并提示尿中所存在的細菌數目在10 5個/ml以上,但顏色的強度與所存在的細菌數不成正比例關系。
14.2 陰性結果并不表示尿液中無細菌存在,陰性結果可見于非硝酸鹽轉化型細菌的尿路感染。當尿液在膀胱內儲留時間不足4小時以上以便使硝酸鹽被還原,或者飲食中缺乏硝酸鹽,盡管尿液中所存在之細菌含有還原酶,其試驗結果也可能為陰性。
14.3 高比重的尿液可降低亞硝酸鹽試驗的靈敏度。對于含有少量亞硝酸鹽(等于或少于13mmol/L)的樣本,尿液中的維生素C濃度等于或大于1.42mmol/L時可產生假陰性結果。
15.
當檢驗系統(儀器)不能工作時,所采取的補救措施:當檢驗系統(儀器)不能工作時,可聯系儀器廠家,進行緊急修理,如一時
不能修好,如別的實驗室有同類儀器可到別的儀器上先測,如別的實驗室無同類儀器,申請廠家送一臺能正常工作的儀器代替。