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  • 發布時間:2020-02-05 22:33 原文鏈接: 如何從細胞和組織提取物中有效分離和富集K48多聚泛素

    泛素(Ubiquitin,Ub)對蛋白質的翻譯后修飾,對它們的區室化,降解和功能產生了深遠的影響。單個Ub與靶蛋白的結合被稱為單泛素化,另外的Ub部分可以與該初始Ub綴合,形成多聚泛素(polyUb)鏈。這些polyUb鏈通過Ub的C末端與靶蛋白的賴氨酸之間形成異肽鍵而連接。PolyUb鏈本身通過各個單體Ub單元之間的類似綴合機制形成,并且可以通過Ub中存在的所有賴氨酸(K6,K11,K27,K29,K33,K48和K63)連接。


    兩種表征的最充分的多泛素化形式是通過連接在賴氨酸48(K48)或賴氨酸63(K63)上發生的。K48連接多聚泛素化最常見的后果是蛋白酶體介導的降解,而K63連接的多泛素化修飾與其他細胞過程有關,DNA損傷反應的調節,胞內分選,錯誤折疊/聚集蛋白的自噬和神經變性。其它賴氨酸的多聚泛素蛋白連接尚不顯著,其生理作用仍然大部分未知。 

    什么是TUBE

    TUBE(Tandem Ubiquitin Binding Entities, 串聯泛素結合實體),基于已知具有對泛素親和力的蛋白質結構域,經過深度整合,創造性地開發出了TUBEs結合實體。與單泛素結合相關結構域(UBA)相比,TUBE對多泛素部分的親和力可增加高達1000倍。此外,TUBE對多泛素化蛋白質具有保護作用,允許以相對低的豐度進行檢測。這些特性有助于有效地“捕獲”多泛素化狀態的蛋白質。


    如何從細胞和組織提取物中有效分離和富集K48-多聚泛素以便用于蛋白質組學的研究?

    您推薦由泛素研究的引領者推出的高品質高性能的K48泛素鏈特異性的串聯結合實體(K48 TUBE HF),已被廣大泛素領域科學家廣泛使用。

    PS:

    與其它連接類型相比,K48泛素鏈特異性的串聯結合實體K48-TUBE HF(高保真的第二代)對K48鏈的多聚泛蛋白的親和力和選擇性會強上100倍,是一種極度靈敏且經濟的工具。此外,LifeSensors公司對于K48-TUBE HF進行了不同的標簽修飾,可以滿足不同研究者的多樣化實驗需求。

    K48泛素鏈特異性的串聯結合實體優點:


    1. 對K48多聚泛素鏈的納摩爾親和力;


    2. 對K48多聚泛素鏈的親和力與其它所有連接相比高100倍;


    3. 與大多數泛素抗體相比,TUBE對多聚泛素的親和力更高;


    4. 避免表位標記的泛素過表達導致下拉。

    【測試結果】:


    【測試結果】:


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