大鼠ELISA試劑盒檢測系統可謂是免疫學反應應用到科研出產中zui為廣泛zui為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間，跟著自己技術水平得進步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現在做方陣，做大鼠ELISA試劑盒已是輕車熟路了，以前檢測一種抗體用整整一下戰書還算得暈暈的，現在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低。
操作步驟
①兔抗人IgG 作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾去凹孔內的液體，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h。
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗)：將含單克降抗體的細胞培養上清在另-塊板上用PBS 連續稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每個樣品平行做兩份，PBS或空白培養基作為陰性對照，大鼠ELISA試劑盒已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
⑦加酶標抗抗體：兔抗鼠IgG-HRP，用封閉液l ：8000稀釋，100μL／孔，加蓋37℃恒溫箱溫育1h。
⑧洗滌：用洗滌液洗5次，蒸餾水洗2次。
⑨顯色：加新鮮配制的底物溶液100μL/孔，室溫暗處放置5～30min，顯示藍色。
⑩終止反應、比色：加50μL/孔終止液。顏色變黃；大鼠ELISA試劑盒用酶標儀測定450nm 處各孔的吸光值，陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。