同種異體BK病毒特異性T細胞性多灶性白質腦病臨床治療

　　來自美國M.D. Anderson癌癥中心的科學家們闡述了利用T細胞療法治療進行性多灶性白質腦病（PML）的II期臨床實驗結果。

　　《新英格蘭醫學雜志》近日發表了一篇備受矚目的文章《Allogeneic BK Virus–Specific T Cells for Progressive Multifocal Leukoencephalopathy》，來自美國M.D. Anderson癌癥中心的科學家們闡述了利用T細胞療法治療進行性多灶性白質腦病（PML）的II期臨床實驗結果。MRI核磁共振結果顯示，通過向PML患者體內注射活化的外源性異體T細胞，可顯著緩解PML的臨床癥狀和影像學特征；另外患者腦脊液（CSF）中的JC病毒DNA隨著T細胞的輸入濃度明顯降低，并最終被清除；MC質譜流式數據顯示，異體T細胞可穿過患者的血腦屏障，在注射后不同的時間點取患者外周血樣進行分析發現供體?病毒特異性T細胞主要為CD4細胞，其在患者體內可以擴增并分化成為具有記憶型和活化型等表型特征的多種T細胞亞群。

　　進行性多灶性白質腦病多發于免疫力低下的人群，如AIDS患者、癌癥患者、接受造血干細胞移植以及免疫抑制藥物治療的病人等，引起PML的病毒有JC、BK、SV40及AS等多種類型。感染通常導致患者出現精神狀態失常、運動功能障礙、共濟失調等癥狀，并且是進行性的甚至是致命的。目前臨床上除了恢復細胞免疫功能外，還沒有十分有效的治療手段，但是該方法對于絕大多數免疫功能失常的PML患者來說基本上是不可行的。

　　來自M.D. Anderson癌癥中心的科學家們對3名PML患者開展了臨床II期的T細胞免疫治療。這3名患者在治療之前依次為接受臍帶血移植、ruxolitinib藥物治療以及AIDS患者。研究人員每隔4周向3位患者體內輸入第三方生產的冷凍保存的BK病毒特異性T細胞，直至檢測顯示從CSF中清除了JC病毒，之后通過影像學檢測和質譜流式分析等方法，對該異體T細胞治療PML的效果進行多方面的臨床數據評估，并對供體病毒特異性T細胞進行追蹤和全面的表型分析。

　　隨著供體T細胞的輸入，所有三名患者CFS中的JC病毒含量均出現了不同程度的明顯降低，并伴隨臨床癥狀的緩解，通過進一步MRI結果觀察到腦白質病變部分縮小或是與免疫重建炎癥綜合征（IRIS）一致的表征。在持續接受3-4次供體T細胞注射后，患者1完全康復，患者3則完全恢復了獨立生活能力。

　　在該研究中，由于供體患者1的T細胞間的HLA-Bw不完全匹配（供體病毒特異性T細胞為HLA-Bw6陽性，受體移植的臍血單元為HLA-Bw6陰性），因此研究人員可在體內通過流式檢測追蹤供體T細胞向CFS的運輸情況。首次注射后14天，在患者外周血中檢測到的供體病毒特異性T細胞群增殖至初始狀態的294倍；另外患者CSF中約20％的CD3細胞是供體來源，表明供體T細胞可穿過血腦屏障向中樞神經系統轉運。注射250天后，在受體CFS中仍可檢測到具有Tem表型特征的供體病毒特異性T細胞，表明活化的Th1細胞歸巢于CSF。

　　研究人員進一步在異體T細胞注射后的不同時間點對患者外周血樣本取樣進行詳細的細胞表型和特征分析。利用質譜流式技術（Mass Cytometry，該技術的最大優勢在于使用金屬標簽標記抗體，無需補償，可大幅拓展檢測通道范圍），作者設計了含40個標志物的檢測panel，這樣通過單樣本、單次上機檢測即可對不同免疫細胞及腫瘤細胞的亞群和特征進行全面分析。根據MC提供的多參數檢測大數據，研究人員發現供體病毒特異性T細胞的在受體內的類型主要為CD4細胞，這些細胞在患者體內能夠進一步擴增、分化成為具有記憶型和活化型等表征的多個亞群，這一結果與抗病毒反應是一致的。另外，BK病毒和JC病毒存在高度同源性，數據顯示針對BK病毒的特異性T細胞在PML患者體內可有效地識別和清除JC，研究人員進一步準確鑒定出了特異的抗原表位。

　　該項研究在臨床水平驗證了第三方生產的HLA部分匹配的BK病毒特異性T細胞用于PML治療的有效性，并取得了良好的臨床效果，為治療那些免疫力低下的PML患者提供了新的可行性方案。