1.實驗室檢查
真菌直接鏡檢可見內有孢子的孢子囊。室溫下真菌培養可見菌絲關節孢子。
2.血清學檢查
（1）IgM（免疫球蛋白M） 本病的診斷指標為，急性感染患者大多數可在感染前4周內被檢測出特異性的IgM，在2個月時消失，提示患者已經發生播散性感染。
（2）IgG（免疫球蛋白G） IgG抗體在感染后4天至12周升高，在播散性感染后持續陽性，病情一旦恢復即消失。
（3）組織病理檢查 原發性皮膚球孢子茵病為慢性肉芽腫。內有嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞及漿細胞浸潤，有時可見小膿瘍，內含有內孢子的孢子囊。進行性播散球孢子菌病則膿瘍形成，可見酪樣壞死，在異型巨細胞內可見內孢子囊。