1.產前診斷
（1）母血抗體滴度監測 Rh陰性的孕婦若與丈夫的Rh血型不合，可作抗人球蛋白間接試驗監測孕婦抗體。
（2）產前B超檢查 對了解胎兒溶血程度有一定價值，主要觀察有無胎兒水腫、腹水、胸腔積液、肝脾腫大、胎盤水腫、羊水量等。
（3）羊水檢查 羊膜穿刺是最常用的宮內有創操作。
（4）胎兒紅細胞血型檢查 為在B超引導下進行經皮臍血采樣（臍穿刺），不僅可以直接測定胎兒紅細胞抗原和血紅蛋白水平，還可提供宮內輸血的血管途徑。
2.生后診斷
依據病史及典型臨床體征考慮本病時，應進一步作以下相關試驗室檢查。
（1）判斷新生兒是否存在溶血 主要依據臍血或新生兒血紅細胞和血紅蛋白下降,網織紅細胞升高以及血清間接膽紅素顯性升高，提示患兒存在溶血。確診需要血清特異性免疫抗體的檢查。
（2）溶血是否由Rh血型不合所致 直接Coombs試驗陽性即可確診。可以做釋放試驗確定Rh血型抗體的類型。