1)免疫萃取(innunoextraction)
IAC 技術最簡單的應用就是單純作為樣品的預處理手段,即制備免疫親和柱,也稱為離線(off-line)IAC。現在市場上已有克倫特羅、黃曲霉毒素等多種免疫親和柱出售,使用效果非常好。
2)IAC 聯用技術
IAC 聯用技術也可稱為在線 IAC。將 IAC 設備與 HPLC、LC/MS、GC/MS、CE 儀器連接,提純后的樣品直接進樣檢測。與離線模式不同,樣品純化、分析實現自動化,主要通過柱切換技術進行連接。20世紀70年代末,剛性、高效固相支持物的出現使抗體固定技術應用于高效液相色譜,由此產生了高效免疫親和色譜(HPIAC)。HPIAC 是在線 IAC 的一種應用形式,簡化了分析過程并將分離、定性、定量一體化。HPIAC 中大多使用硅膠與玻璃免疫吸附劑,應用于直接分析殘留物還不是很普遍,有時免疫親和柱上的洗脫物峰不是很尖,因為解吸附作用比理論上要慢。
3)多殘留免疫親和色譜(MIAC)
MIAC 更加集中了 IAC 的優勢,可在一個色譜過程中提取多個樣品。親和柱上偶聯一種抗體提純幾種結構相關的簇特異性抗原,或偶聯多種抗體分別提純多種交叉反應率低的分析物都是常用的方式。MIAC 可用于離線和在線方式。
4)放射熒光檢測法
放射熒光檢測法也是一種很好的定量方法。Shelver 和 Smith應用 IAC 凈化技術處理樣品,檢測β-興奮劑萊克多巴胺及其代謝物。他們以單克隆抗體為配基,并結合了放射性親和色譜作為檢測方法。
5)柱后免疫檢測
色譜免疫分析法也能檢測其他色譜柱的洗脫液,主要是把固定抗體的親和柱或固定有類似物的親和柱接于 HPLC 柱的出口,然后進行直接檢測或免疫測量分析。例如將 HPLC 柱流出液與含有標記抗體或 Fab 片段的溶液相混合,然后將混合液通過固定有類似物的親和柱,與抗體或 Fab 片段結合的分析物會流過柱,到達檢測器。地高辛、生物素都可用此方法進行檢測。
色譜免疫分析法包括競爭結合免疫分析、免疫測量分析、同質免疫分析及酶聯免疫親和色譜等很多種,但這些方法主要應用在醫學檢測方面。隨著農業現代化的推進,獸藥、添加劑殘留檢測也會逐步向這一方向發展,提純和檢測一體化一直是我們的目標。