人維生素DELISA檢測試劑盒原理：
試劑盒采用雙抗體步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被維生素D（VD）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素D（VD）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
人維生素DELISA檢測試劑盒注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用充分搖勻。
人維生素DELISA檢測試劑盒組成部分：
1、人1,25二羥基維生素D3elisa檢測試劑盒酶和底物：在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2、抗體：在ELISA中應用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
3、抗原：在ELISA中應用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
4 、人維生素DELISA檢測試劑盒包被：將免疫活性物質(抗原或抗體)結合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學交聯法及親和素-生物素間接包被法。
5、固相載體：固相載體是ELISA中用以分離結合標記物和游離標記物的主要手段，應與各種免疫活性物質有良好的結合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。