實驗方法原理 選用2種針對rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb,1種McAb作為包被抗體,另1種McAb標記辣根過氧化物酶(HRP)作為結合物,催化底物顯色。根據標準品OD值繪制標準曲線,在標準曲線上查出待檢標本的含量。
實驗材料 包被抗體酶標抗體標準品ABTS底物
試劑、試劑盒 緩沖液洗滌液稀釋液終止液
儀器、耗材 ELISA板
實驗步驟
1. 向ELISA板中加入稀釋好的包被抗體100 μl/孔,4 ℃ 24~48 h
2. 洗3次,加入10倍連續稀釋的待測標本(做4個稀釋度即可)或倍比稀釋的標準品(6個稀釋度)100 μl/孔,37 ℃,1 h
3. 洗3次,加入稀釋好的酶標抗體100 μl/孔,37 ℃,45 min
4. 洗4次,加入配好的ABTS底物液100 μl/孔,RT,30 min
5. 測410 nm OD
6. 繪標準曲線
注意事項
1. 待檢標本必須無污染,無溶血。
2. 標本稀釋后加入ELISA板時,注意從低濃度向高濃度依次加入。
3. 結合物稀釋液和底物緩沖液中禁止加入疊氮鈉。