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  • 發布時間:2020-08-17 23:29 原文鏈接: 人α2a,α2b干擾素檢測實驗

    實驗方法原理 選用2種針對rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb,1種McAb作為包被抗體,另1種McAb標記辣根過氧化物酶(HRP)作為結合物,催化底物顯色。根據標準品OD值繪制標準曲線,在標準曲線上查出待檢標本的含量。

    實驗材料 包被抗體酶標抗體標準品ABTS底物

    試劑、試劑盒 緩沖液洗滌液稀釋液終止液

    儀器、耗材 ELISA板


    實驗步驟

    1.  向ELISA板中加入稀釋好的包被抗體100 μl/孔,4 ℃  24~48 h


    2.  洗3次,加入10倍連續稀釋的待測標本(做4個稀釋度即可)或倍比稀釋的標準品(6個稀釋度)100 μl/孔,37 ℃,1 h

        

    3.  洗3次,加入稀釋好的酶標抗體100 μl/孔,37 ℃,45 min

        

    4.  洗4次,加入配好的ABTS底物液100 μl/孔,RT,30 min

                 

    5.  測410 nm OD

             

    6.  繪標準曲線


    注意事項

    1.  待檢標本必須無污染,無溶血。

      

    2.  標本稀釋后加入ELISA板時,注意從低濃度向高濃度依次加入。

      

    3.  結合物稀釋液和底物緩沖液中禁止加入疊氮鈉。


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