隨著現代臨床免疫學不斷發展,ELISA法比較靈敏,不需特殊設備,可以定性分析,所以應用發展迅速。ELISA手工法已成為醫學檢驗領域的現實。但在實際工作中,可能會因操作不當而出現一些異常指標。近幾年來筆者在免疫室工作中獲得一些經驗和體會,現介紹如下[1,2]。
(1)待檢血清應新鮮或冰凍保存,不能污染,否則可出現非特異性反應;較嚴重溶血,標本易出現假陽性。
(2)在溫育時,反應板有時受到異常劇烈的震動,致使有的陽性標本板孔中的液體濺入陰性板孔中,盡管馬上洗板,還會造成部分陰性標本的假陽性。原因可能是有時陽性標本濃度太高,種特異性反應比較迅速,一旦失手發生此情況,建議重做。
(3)洗板時:①洗板不徹底,未除去實驗中沒參與反應的酶類物質,造成HBsAg、HBsAb和HBeAg的假陽性;或HBeAb和HBcAb的假陰性。②加注洗滌液時沖力過大;將包被在固相載體表面的成分脫落導致HBsAg、HBsAb、HBeAg假陰性;或HBeAb和HBcAb的假陽性。
(4)有時我們在加樣過程中,常常會遇到別標本未離心等情況,為了節約時間,往往這時我們會先加酶結合物,然后等標本分離好后再加標本,殊不知,這樣,竟常常會造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因為HBeAb和HBcAb都是競爭抑制法,先加入酶標記的抗體,首先與固相載體上的抗原結合,待加入顯色劑后,因酶的存在而顯色,故呈陰性。
總之,一點小小的疏忽、失誤可能造成檢驗結果的相悖,給及家屬帶來物質精神上的損失,給臨床確診帶來麻煩。因此,作為檢驗工作人員,工作中要盡量減少失誤,嚴格遵守操作規程,并及時總結經驗,提高我們的檢驗工作水平,為臨床提供可靠的診斷依據。
【參考文獻】
1 李天星.現代臨床免疫學檢驗.北京:軍事醫學科學出版社,2001, 57.
2 趙長春,王庭檢,楊春生.臨床免疫檢驗學.天津:天津科學技術出版社,2001,58-82.