中性粒細胞數量減少和功能失調的檢測方法及臨床意義

中性粒細胞是人體防御系統的重要組成部分，與機體的非特異性抗感染過程有關，該類細胞具有強大的吞噬殺菌功能，其作用過程歷經趨化運動，識別并結合吞噬物質，進而攝入胞內，最終殺傷并降解病原體。  

　　目前，中性粒細胞作為急性炎癥的重要指標之一，國內大部分實驗室僅做常規的白細胞計數，個別實驗室采用趨化試驗和吞噬功能檢查，但遠不能反映中性粒細胞吞噬殺滅病原體的復雜過程。因此，有必要開展新的檢測技術，從各個環節找出中性粒細胞功能失調的原因，為臨床診斷由中性粒細胞減少和功能失調所造成的疾病提供幫助，現將這方面的進展作一概括綜述。

一、與中性粒細胞數量減少相關的疾病

　　正常人外周血白細胞總數為4.0-10.0×109/L，中性粒細胞約占60%-70%。中性粒細胞的過多或過少常與許多疾病的發生發展有關。當血液中中性粒細胞低于0.5×109/L，病人可因非特異性抗感染能力的極度低下而致惡重感染。但是也有些病人盡管中性粒細胞缺乏較為嚴重，但只要其皮膚和粘膜的天然屏障作用沒有遭到破壞也能避免感染的發生。

　　中性粒細胞數量減少引起的疾病有網狀發育不全，Kostmann 綜合征，Shwachman-Diamond綜合征，Griscelli綜合征，Chediak-Higashi綜合征，高IgM綜合征，自身免疫性淋巴細胞增生等疾病。

二、與中性粒細胞功能失調相關的疾病

　　有些細菌被中性粒細胞吞噬后，能干擾吞噬體和溶酶體融合，或產生超氧化物歧化酶和過氧化氫酶以逃避 活性氧中介物和活性氧中介物的殺傷作用，從而出現中性粒細胞功能失調，引起機體非特異性抗感染能力低下，導致反復感染和一些免疫缺陷病。

　　中性粒細胞的吞噬殺菌是一個較復雜的過程，任何一環節的作用機制被阻斷或發生障礙能引起許多免疫缺陷病。例如,中性粒細胞趨化障礙可引起白細胞粘連缺陷綜合征，Chediak-Higashi綜合征，高IgE綜合征以及糖原儲積病。中性粒細胞結合功能障礙主要造成白細胞粘連缺陷綜合征，脫顆粒功能障礙引起Chekiak-Higashi綜合征或中性粒細胞特異性缺陷。由各類酶缺陷造成的中性粒細胞殺菌活性障礙要引起慢性肉芽腫病。

三、中性粒細胞數量和功能的檢測

　　中性粒細胞數量的檢測常規采用外周血白細胞計數，亦可進行骨髓涂片，用蘇木精-伊紅染色，觀察骨髓祖細胞的發育過程，判斷是否存在因細胞成熟障礙而導致白細胞數量減少。

　　中性粒細胞功能失調隨其發生原因不同可采用多種辯證法，從不同角度加以檢測，籍以了解其功能失調的主要環節，協助臨床采取針對防治措施。簡述如下。

　　1. 趨化功能的檢測 中性粒細胞受到某些化學因子的作用以后，可以向因子源方向移動，這種現象稱趨化作用，該化學物質稱為趨化因子。受趨化因子作用后，中性粒細胞表面的L-選 擇素數量增加，血管內皮細胞開始表達P-選擇素或E-選擇素。這兩類選擇素結合可使細胞貼向血管壁。這時中性粒細胞迅速表達整合素，例如，淋巴細胞功能相關抗原LAF-1等，與內皮細胞的配體結合，使中性粒細胞變扁，緊密粘貼內皮細胞，繼而中性粒細胞變形移出血管外，以阿米巴運動的方向因子源移動。這種過程多發生在毛細血管后微靜脈血流緩慢處。

　　檢測趨化作用通常用Borden小室法。該裝置被1個帶有5-8μm大小不等孔徑的濾膜分為上下兩室。上室置白細胞懸液，下室置趨化劑。通過趨化劑的擴散 ，在濾膜上形成一個濃度梯度。濾膜經染色后，顯微鏡下測量中性粒細胞在膜內行進的距離，求其趨化單位。

　　國內也有用瓊脂糖凝膠平板法。在含小牛血清1%的瓊脂平板上，用打孔器以每3孔為一組打孔。在中央孔加細胞懸液，兩側分別加趨化因子或對照用培養液。經37℃溫育后固定染色，測量細胞移動距離。