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  • 發布時間:2020-07-20 23:40 原文鏈接: 不同質量的內切酶,實驗結果大不相同

    不好的內切酶常常被各種蛋白酶、非特異外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的內切酶切割DNA,則會在切割底物的同時破壞產物的末端(外切酶偷偷切掉1、2個bp,瓊脂糖電泳卻看不出來),讓后續的連接、克隆和表達出現問題!

    而NEB提供的內切酶大部分都經過重組改造,在最大程度上避免了外切酶污染的問題,讓你的基因安全可靠!

    好的內切酶

    不好的內切酶

    · 活性高
    · 品質穩定,保存期長
    · 無其它核酸酶污染(包括外切酶污染)

    ·活性不高
    ·保存一段時間后活性迅速下降
    ·有其它核酸酶的污染(包括外切酶污染)

    成功連接,克隆并表達

    連接失敗,克隆不成功,無法表達或產物不正確

    質粒DNA


    酶切反應   
    好的內切酶切割    不好的內切酶切割 
    完整的DNA片段         連接   完整的DNA片段               少量的外切酶損壞DNA末端               不完整的DNA片段+1、2個dNTP       連接  


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